| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| 1.1 酿酒酵母 | 第7-8页 |
| 1.1.1 酿酒酵母概述 | 第7页 |
| 1.1.2 酿酒酵母的应用 | 第7页 |
| 1.1.3 利用酿酒酵母研究人类基因的优势 | 第7-8页 |
| 1.2 酿酒酵母孢子 | 第8-10页 |
| 1.2.1 酵母孢子的形成 | 第8-9页 |
| 1.2.2 孢子壁的结构 | 第9页 |
| 1.2.3 孢子壁的形成过程 | 第9-10页 |
| 1.3 人类cDNA文库 | 第10-11页 |
| 1.4 人类4-羟苯丙酮酸二加氧酶（HPD）简介 | 第11页 |
| 1.5 本课题研究意义 | 第11-12页 |
| 1.6 主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-16页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第13-14页 |
| 2.1.2 酶及试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 培养基以及缓冲液配方 | 第14-15页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-25页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第16-17页 |
| 2.2.2 大肠杆菌转化质粒 | 第17页 |
| 2.2.3 质粒载体添加酶切位点 | 第17-18页 |
| 2.2.4 目的载体的构建 | 第18页 |
| 2.2.5 酵母表达质粒的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.6 检测不同产孢率的酿酒酵母在紫外光下的荧光强度 | 第19-20页 |
| 2.2.7 酿酒酵母转化质粒 | 第20页 |
| 2.2.8 筛选导致产孢缺陷的人类基因 | 第20-21页 |
| 2.2.9 候选基因的复筛 | 第21页 |
| 2.2.10 酵母孢子DAPI染色 | 第21-22页 |
| 2.2.11 酿酒酵母孢子乙醚敏感性检测 | 第22页 |
| 2.2.12 孢子子囊壳破碎 | 第22页 |
| 2.2.13 孢子壁二酪氨酸层检测 | 第22-23页 |
| 2.2.14 体外添加尿黑酸检测 | 第23-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-41页 |
| 3.1 酵母表达质粒的构建 | 第25-27页 |
| 3.1.1 目的载体的构建 | 第25-26页 |
| 3.1.2 构建含有人类基因的酵母表达质粒 | 第26-27页 |
| 3.2 酿酒酵母产孢率与荧光强度的关系 | 第27-28页 |
| 3.3 筛选特异性抑制产孢过程的人类基因 | 第28-30页 |
| 3.3.1 高通量筛选人类基因 | 第28-29页 |
| 3.3.2 复筛候选基因 | 第29-30页 |
| 3.4 检测酿酒酵母减数分裂是否发生 | 第30-32页 |
| 3.5 表达HPD基因孢子的乙醚敏感性检测 | 第32页 |
| 3.6 表达HPD基因对二酪氨酸层的影响 | 第32-36页 |
| 3.6.1 检测表达HPD基因对孢子壁上二酪氨酸总量的影响 | 第32-33页 |
| 3.6.2 表达HPD基因孢子的产孢培养基检测 | 第33-36页 |
| 3.7 体外添加尿黑酸检测 | 第36-39页 |
| 3.7.1 产孢过程中添加尿黑酸对孢子乙醚敏感性的影响 | 第36页 |
| 3.7.2 尿黑酸在产孢过程中氧化变色 | 第36-37页 |
| 3.7.3 体外添加尿黑酸检测孢子的氧化性 | 第37-39页 |
| 3.8 二酪氨酸层的形成以及尿黑酸对其影响的推测 | 第39-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 主要结论 | 第41页 |
| 展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
