| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 文献综述 | 第8-13页 |
| 1.1 脂肪酶简介 | 第8-10页 |
| 1.1.1 脂肪酶的来源及分类 | 第8页 |
| 1.1.2 脂肪酶的结构特点和作用机理 | 第8-9页 |
| 1.1.3 脂肪酶的应用 | 第9-10页 |
| 1.2 国内外昆虫脂肪酶的研究现状 | 第10页 |
| 1.3 昆虫免疫系统 | 第10-13页 |
| 2 引言 | 第13-15页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第13页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第13-14页 |
| 2.2.1 柞蚕ApLSP的原核表达及多克隆抗体制备 | 第13页 |
| 2.2.2 柞蚕ApLSP组织表达分布 | 第13页 |
| 2.2.3 柞蚕ApLSP在中肠和马氏管中的诱导表达模式 | 第13-14页 |
| 2.2.4 温度及pH对ApLSP活性的影响 | 第14页 |
| 2.3 技术路线 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-29页 |
| 3.1 实验材料 | 第15页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第15-18页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第15-16页 |
| 3.2.2 主要生化试剂 | 第16页 |
| 3.2.3 主要溶液的配置 | 第16-18页 |
| 3.3 实验方法 | 第18-29页 |
| 3.3.1 柞蚕蚕饲养 | 第18-19页 |
| 3.3.2 柞蚕组织的收集 | 第19页 |
| 3.3.3 柞蚕总RNA的提取 | 第19页 |
| 3.3.4 提取总RNA质量的检测 | 第19-20页 |
| 3.3.5 柞蚕ApLSP基因的克隆 | 第20-23页 |
| 3.3.6 柞蚕ApLSP基因的原核表达 | 第23-24页 |
| 3.3.7 重组蛋白的检测 | 第24-25页 |
| 3.3.8 重组蛋白的纯化及多克隆抗体制备 | 第25-26页 |
| 3.3.9 实时定量PCR | 第26-27页 |
| 3.3.10 组织中总蛋白的提取 | 第27页 |
| 3.3.11 组织表达分布 | 第27-28页 |
| 3.3.12 免疫刺激对ApLSP表达的影响 | 第28页 |
| 3.3.13 ApLSP活性分析 | 第28页 |
| 3.3.14 数据分析 | 第28-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-38页 |
| 4.1 柞蚕ApLSP基因的序列分析 | 第29页 |
| 4.2 柞蚕ApLSP基因的克隆 | 第29-30页 |
| 4.3 柞蚕ApLSP重组表达载体的菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 4.4 柞蚕ApLSP蛋白表达的SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第31-32页 |
| 4.5 柞蚕ApLSP蛋白纯化 | 第32-33页 |
| 4.6 柞蚕ApLSP组织表达分布 | 第33-34页 |
| 4.7 柞蚕ApLSP在中肠和马氏管中的诱导表达模式 | 第34-35页 |
| 4.8 温度及pH对ApLSP活性的影响 | 第35-36页 |
| 4.9 金属离子、抑制剂和表面活性剂对ApLSP稳定性的影响 | 第36-38页 |
| 5 讨论 | 第38-40页 |
| 6 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 个人简介 | 第47页 |
| 在研期间发表论文 | 第47页 |
