中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
文献综述 | 第12-17页 |
1 草莓镶脉病毒研究现状 | 第12-14页 |
1.1 草莓镶脉病毒分布以及危害 | 第12页 |
1.2 草莓镶脉病毒基因结构和编码蛋白 | 第12-13页 |
1.3 草莓镶脉病毒启动子研究 | 第13页 |
1.4 草莓镶脉病毒致病相关基因的研究 | 第13页 |
1.5 草莓镶脉病毒沉默抑制子的研究 | 第13-14页 |
2 CaMV P6蛋白的功能研究 | 第14页 |
2.1 CaMV P6是反式激活蛋白 | 第14页 |
2.2 CaMV P6是症状决定子 | 第14页 |
2.3 CaMV P6 是沉默抑制子 | 第14页 |
2.4 Ca MV P6 能调控植物水杨酸通路 | 第14页 |
3 植物病毒内含体 | 第14-15页 |
4 植物病毒的运输 | 第15页 |
5 植物病毒核定位蛋白 | 第15-17页 |
5.1 植物病毒核定位蛋白特征 | 第15页 |
5.2 病毒核定位蛋白的功能 | 第15-17页 |
5.2.1 协助病毒基因组进入细胞核 | 第15-16页 |
5.2.2 抑制转录后基因沉默 | 第16页 |
5.2.3 控制寄主的的症状表型 | 第16-17页 |
引言 | 第17-18页 |
材料与方法 | 第18-22页 |
1 试验材料 | 第18页 |
1.1 植物材料 | 第18页 |
1.2 菌种和载体 | 第18页 |
1.3 酶和化学试剂 | 第18页 |
1.4 抗生素及生长素 | 第18页 |
2 试验方法 | 第18-22页 |
2.1 抽提植物基因组DNA | 第18-19页 |
2.2 PCR产物的克隆及转化 | 第19-20页 |
2.2.1 PCR产物回收和纯化 | 第19页 |
2.2.2 基因重组 | 第19页 |
2.2.3 产物转化大肠杆菌 | 第19页 |
2.2.4 阳性克隆的PCR鉴定 | 第19页 |
2.2.5 质粒抽取 | 第19-20页 |
2.3 农杆菌浸润本氏烟 | 第20页 |
2.3.1 准备适龄本氏烟 | 第20页 |
2.3.2 菌液调配及浸润 | 第20页 |
2.4 植物下表皮DAPI染色 | 第20页 |
2.5 植物蛋白提取 | 第20页 |
2.6 Western Blot | 第20页 |
2.7 Northern印迹分析 | 第20-21页 |
2.8 酵母双杂交(Y2H) | 第21-22页 |
结果与分析 | 第22-33页 |
1 SVBV P6 蛋白能够形成内含体 | 第22-24页 |
2 SVBV P6能定位在细胞核、细胞骨架和内质网,但不能与叶绿体共定位 | 第24-26页 |
2.1 SVBV P6能定位在细胞核 | 第24页 |
2.2 SVBV P6能定位在细胞骨架 | 第24页 |
2.3 SVBV P6能定位在内质网 | 第24页 |
2.4 SVBV P6不能与叶绿体共定位 | 第24-26页 |
3 SVBV P6包涵体沿着微丝移动并且与P1共定位在细胞边界上 | 第26-27页 |
3.1 SVBV P6 内含体沿着微丝移动 | 第26页 |
3.2 SVBV P6包涵体与P1共定位在细胞边界上 | 第26-27页 |
4 SVBV P6蛋白与SVBV编码其他蛋白间的互作 | 第27-28页 |
4.1 酵母双杂交验证SVBV P6蛋白与P1互作 | 第27页 |
4.2 酵母双杂交验证SVBV P6蛋白与P3互作 | 第27-28页 |
5 SVBV P6 蛋白的 25 个氨基酸影响其核定位能力及其内含体形成 | 第28-30页 |
5.1 P6蛋白核定位预测信号缺失突变体的亚细胞定位 | 第28-29页 |
5.2 P6蛋白C端缺失突变体的亚细胞定位 | 第29-30页 |
6 SVBV P6蛋白的25个氨基酸影响P6促进外源基因GFP表达 | 第30-33页 |
讨论 | 第33-36页 |
参考文献 | 第36-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
作者简介 | 第40页 |