| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第9-21页 |
| 1.1 三色堇的花色素研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 甜菜素的研究进展 | 第10-15页 |
| 1.2.1 甜菜素的生物功能及应用 | 第10-11页 |
| 1.2.2 甜菜素的影响因素及提取分析 | 第11-13页 |
| 1.2.3 甜菜素的生物合成 | 第13-15页 |
| 1.3 4,5-多巴雌二醇双加氧酶的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.4 花色素与甜菜素不共存现象的原因推测 | 第17-19页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.6 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要药品试剂及仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-37页 |
| 2.2.1 三色堇花瓣的总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 三色堇DODA基因的Real-time PCR分析 | 第24-25页 |
| 2.2.2.1 引物设计 | 第24页 |
| 2.2.2.2 Real-time PCR cDNA第一链合成 | 第24-25页 |
| 2.2.2.3 VwDODA基因的Real-time PCR | 第25页 |
| 2.2.3 添加外源多巴的三色堇幼苗培育 | 第25-26页 |
| 2.2.4 三色堇DODA基因的克隆 | 第26-32页 |
| 2.2.4.1 引物设计 | 第26页 |
| 2.2.4.2 3'/5'RACE cDNA第一链合成 | 第26-28页 |
| 2.2.4.3 3'/5'RACE扩增 | 第28-30页 |
| 2.2.4.4 3'/5'RACE扩增序列的TA克隆及测序 | 第30-32页 |
| 2.2.5 三色堇DODA基因的生物信息学分析 | 第32页 |
| 2.2.6 三色堇DODA基因的表达载体构建 | 第32-36页 |
| 2.2.6.1 VwDODA基因的全长扩增 | 第32-33页 |
| 2.2.6.2 表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 2.2.7 三色堇DODA基因转化拟南芥 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-53页 |
| 3.1 三色堇花瓣的总RNA提取 | 第37页 |
| 3.2 三色堇DODA基因的Real-time PCR分析 | 第37-38页 |
| 3.3 三色堇幼苗在施加外源多巴培育下的检测结果 | 第38-40页 |
| 3.4 三色堇DODA基因的克隆 | 第40-41页 |
| 3.5 三色堇DODA基因的生物信息学分析 | 第41-48页 |
| 3.5.1 三色堇DODA基因的核酸序列分析 | 第41-42页 |
| 3.5.2 三色堇DODA基因的氨基酸序列分析 | 第42-45页 |
| 3.5.3 三色堇DODA基因的蛋白质结构与功能预测 | 第45-48页 |
| 3.5.3.1 蛋白质一级结构预测 | 第45-46页 |
| 3.5.3.2 蛋白质二级结构预测 | 第46-47页 |
| 3.5.3.3 蛋白质三级结构预测 | 第47-48页 |
| 3.5.3.4 蛋白质功能预测 | 第48页 |
| 3.6 三色堇DODA基因的表达载体构建及转化拟南芥 | 第48-53页 |
| 3.6.1 VwDODA基因的全长扩增 | 第48-49页 |
| 3.6.2 表达载体的构建 | 第49页 |
| 3.6.3 转化拟南芥 | 第49-53页 |
| 4 讨论 | 第53-60页 |
| 4.1 三色堇VwDODA基因的特点 | 第53-57页 |
| 4.2 三色堇中甜菜素与花青素不共存的可能原因 | 第57-59页 |
| 4.3 基因全序列转化模式植物的可行性 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 6 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
