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水稻温敏黄转绿突变体v5的鉴定和基因克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
缩略词说明第12-13页
1 文献综述第13-34页
   ·水稻叶色突变体的研究进展第13-21页
     ·叶色突变体类型第13-14页
     ·水稻叶色突变体的来源第14-16页
       ·自然突变第14-15页
       ·物理化学诱变第15-16页
       ·插入突变法第16页
       ·RNAi技术第16页
     ·叶色突变体相关的基因定位与克隆第16-18页
       ·黄绿叶突变体(黄转绿突变体)相关基因定位与克隆第17页
       ·温敏叶色突变体相关基因定位与克隆第17-18页
     ·叶色突变体的广泛应用第18-21页
       ·叶色突变体应用于功能基因组学第18-19页
       ·叶色突变体应用于育种第19页
       ·叶色突变体应用于生理生化第19-20页
       ·叶色突变体应用于遗传标记第20页
       ·叶色突变体应用于其他途径第20-21页
   ·叶绿体的发生发育过程及其相关基因定位与克隆第21-30页
     ·叶绿体起源第21页
     ·叶绿体基因组表达调控的研究第21-22页
       ·叶绿体基因组转录水平的研究第21-22页
       ·叶绿体基因组转录后调节第22页
       ·叶绿体基因组翻译水平的研究第22页
     ·叶绿体发育分化相关基因研究第22-23页
     ·叶绿素合成相关基因的研究第23-27页
     ·叶绿素降解相关基因第27-28页
     ·细胞质信号传递相关基因第28-29页
     ·其他途径相关基因第29-30页
   ·图位克隆技术的研究第30-31页
     ·图位克隆原理第30页
     ·图位克隆技术的方法第30-31页
   ·水稻转基因技术第31-32页
   ·研究目的和意义第32-34页
2 实验材料与方法第34-52页
   ·实验材料第34-35页
     ·黄转绿温敏突变体v5的来源第34页
     ·突变体v5的生长条件和种植情况第34-35页
     ·实验室常用分子生物学试剂和仪器第35页
   ·实验方法第35-52页
     ·叶绿素含量测定方法第36页
     ·叶绿素荧光动力学参数测定方法第36-37页
     ·净光合速率(P_N)的测定方法第37页
     ·突变体v5的农艺性状考察第37页
     ·透射电镜分析叶绿体超微结构第37-38页
     ·突变体v5的遗传分析第38页
     ·水稻DNA的提取方法第38-39页
     ·PCR反应第39页
     ·电泳方法第39-40页
       ·琼脂糖凝胶电泳方法第39页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳方法第39-40页
     ·初定位方法第40-41页
     ·连锁分析第41页
     ·新标记的开发和OsV5的精细定位第41-42页
     ·候选基因的预测和分析第42页
     ·载体构建方法第42-48页
       ·RNA提取方法第43-44页
       ·第一链cDNA合成第44页
       ·候选基因的DNA片段回收纯化第44-45页
       ·连接方法第45页
       ·酶切体系第45页
       ·感受态细胞的制备(Inoue法)第45-46页
       ·转化方法(热激转化法)第46-47页
       ·质粒提取方法(碱裂解法)第47-48页
       ·阳性菌株检测方法第48页
     ·农杆菌介导的水稻转基因方法第48-51页
       ·水稻愈伤组织的诱导(水稻成熟胚)第49-50页
       ·农杆菌培养第50页
       ·共培养和抗性愈伤组织的选择第50页
       ·抗性愈伤组织的诱导分化和生根第50-51页
       ·转基因苗的锻炼和移栽第51页
     ·转基因材料检测第51-52页
3 实验结果与分析第52-66页
   ·实验结果第52-63页
     ·不同生长时期对突变体v5叶色观察第52-53页
     ·叶绿素含量测定结果第53-54页
     ·叶绿素荧光动力学参数测定第54-55页
     ·净光合速率的测定第55-56页
     ·突变体的农艺性状考察第56-57页
     ·叶绿体透射电镜观察第57-58页
     ·突变体v5的遗传分析第58页
     ·新标记的开发和OsV5的精细定位第58-60页
     ·候选基因的预测和分析第60-61页
     ·载体构建第61-62页
     ·农杆菌介导水稻转基因第62-63页
   ·讨论第63-66页
     ·突变体v5的突变表型第63页
     ·突变体v5的叶绿素含量与叶绿素荧光动力学参数测定第63-64页
     ·突变体v5的农艺性状考察第64页
     ·突变体v5的透射电镜观察第64页
     ·OsV5基因第64-66页
4 结论和研究展望第66-68页
   ·结论第66-67页
   ·下一步研究展望第67-68页
参考文献第68-76页
附录第76-84页
致谢第84-85页
攻读硕士期间发表的学术论文目录第85-86页
项目支持第86-88页

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