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细粒棘球绦虫EgAgB8/1重组抗原和EgAgB8/1-EgAgB8/2重组嵌合抗原表达系统的构建和血清学诊断价值的比较

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
前言第12-14页
材料与方法第14页
1. 材料第14-20页
2. 实验方法第20-29页
   ·细粒棘球绦虫原头蚴总RNA的提取及第一链cDNA合成第20-21页
     ·提取总RNA第20-21页
     ·第一链cDNA合成第21页
   ·EgAgB8/1、EgAgB8/1-EgAgB8/2编码基因的克隆及鉴定第21页
     ·EgAgB8/1目的基因片段的克隆和鉴定第21页
     ·EgAgB8/1-EgAgB8/2目的基因片段的克隆和鉴定第21页
   ·重组质粒pMD18-T/EgAgB8/1、pMD18-T/EgAgB8/1-EgAgB8/2的构建及鉴定第21-23页
     ·重组质粒的构建第21-23页
     ·重组质粒的鉴定第23页
   ·EgAgB8/1、EgAgB8/1-EgAgB8/2抗原目的基因序列的测定及分析第23-24页
   ·原核表达质粒pET32a-EgAgB8/1和pET32a-EgAgB8/1-EgAgB8/2的构建第24-25页
     ·提取空质粒pET32a,pMD18-T/EgAgB8/1及pMD18-T/EgAgB8/1-EgAgB8/2第24页
     ·双酶切空质粒pET32a和pMD18-T/EgAgB8/1及pMD18-T/EgAgB8/1-EgAgB8/2重组质粒第24-25页
     ·胶回收目的片段第25页
     ·pET32a双粘质粒分别与双粘靶片段EgAgB8/1及EgAgB8/1-EgAgB8/2连接第25页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与重组子的细菌转化第25页
     ·重组质粒pET32a-EgAgB8/1和pET32a-EgAgB8/1-EgAgB8/2的筛选与鉴定第25页
     ·重组质粒pET32a-EgAgB8/1和pET32a-EgAgB8/1-EgAgB8/2的序列测定和分析第25页
   ·重组蛋白的诱导表达第25-27页
     ·pET32a-EgAgB8/1重组抗原的表达第25-26页
     ·pET32a-EgAgB8/1-EgAgB8/2重组抗原的表达第26页
     ·重组蛋白的SDS-PAGE检测第26-27页
   ·pET32a-EgAgB8/1和pET32a-EgAgB8/1-EgAgB8/2重组抗原的纯化第27页
   ·重组蛋白的Western blot反应第27-29页
结果第29-39页
讨论第39-42页
小结第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-48页
综述第48-58页
 参考文献第54-58页
攻读硕士学位期间发表的学位论文第58-59页
导师评阅表第59页

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