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加工番茄与ToMV和CMV相关蛋白相互作用的初步研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
中英符号缩略词表第9-10页
目录第10-12页
前言第12-13页
第一章 文献综述第13-24页
   ·番茄病毒病及番茄抗病毒研究进展第13-15页
   ·黄瓜花叶病毒的研究概况第15-17页
     ·黄瓜花叶病毒的生物学特性第15-16页
     ·黄瓜花叶病毒基因组结构第16-17页
   ·番茄花叶病毒研究概况第17-19页
     ·ToMV的生物学特性第17-18页
     ·ToMV的基因组结构第18-19页
   ·酵母双杂交技术的应用研究进展第19-22页
     ·传统酵母双杂交技术第19-20页
     ·Cyto Trap酵母双杂交系统第20-21页
     ·酵母双杂交技术的应用现状第21-22页
     ·酵母双杂交技术在植物病毒学中的应用第22页
   ·本课题的主要目的和研究方法第22-24页
第二章 诱饵载体的构建及验证第24-39页
   ·材料第24-27页
     ·本实验所用的菌株和质粒载体第24-25页
     ·常用试剂及试剂盒第25-26页
     ·酵母常用试剂及培养基的配制第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
   ·方法第27-32页
     ·目的片段的制备第27-29页
     ·诱饵载体的制备第29-30页
     ·诱饵菌株转录自激活性及毒性的检测第30-32页
   ·结果与分析第32-38页
     ·ToMV CP,MP和CMV 2b基因的扩增第32-34页
     ·重组质粒的酶切鉴定第34-36页
     ·酵母菌株cdc25H的表型验证第36页
     ·诱饵蛋白毒性及转录活性的检测分析第36-38页
   ·小结与讨论第38-39页
第三章 加工番茄cDNA文库制备第39-45页
   ·材料第39页
     ·加工番茄的组织样品第39页
     ·常用试剂及试剂盒第39页
     ·引物第39页
   ·方法第39-42页
     ·接种CMV和ToMV第39-40页
     ·加工番茄总RNA提取和mRNA分离纯化第40页
     ·加工番茄文库双链cDNA的合成第40-41页
     ·cDNA末端的钝化及接头的连接第41页
     ·EcoRⅠ末端的磷酸化及酶切第41页
     ·cDNA纯化回收与pMyr载体的连接及转化第41页
     ·cDNA文库的鉴定与保存和扩增文库滴度测定第41-42页
   ·结果与分析第42-44页
     ·总RNA的提取及mRNA的分离第42页
     ·双链cDNA的合成纯化结果第42-43页
     ·库容量、插入片段的重组率和大小第43页
     ·文库的扩增及滴度检测第43-44页
   ·小结与讨论第44-45页
第四章 酵母双杂交筛选与CP,MP,2b相互作用的基因第45-55页
   ·材料第45页
     ·菌株、质粒与载体第45页
     ·主要试剂及培养基第45页
   ·方法第45-48页
     ·用共转化方法筛选与CP,MP,2b互作的基因第45页
     ·对照菌株的小量转化第45-46页
     ·阳性克隆的初步筛选与鉴定第46-48页
   ·结果与分析第48-51页
     ·共转化结果第48-49页
     ·菌落PCR鉴定结果第49-50页
     ·阳性克隆质粒酶切鉴定结果第50-51页
     ·阳性克隆测序及序列比对结果第51-53页
   ·小结与讨论第53-55页
第五章 结果与讨论第55-57页
参考文献第57-62页
附录第62-66页
致谢第66-67页
作者简介第67-68页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第68页

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