中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
中英符号缩略词表 | 第9-10页 |
目录 | 第10-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
·番茄病毒病及番茄抗病毒研究进展 | 第13-15页 |
·黄瓜花叶病毒的研究概况 | 第15-17页 |
·黄瓜花叶病毒的生物学特性 | 第15-16页 |
·黄瓜花叶病毒基因组结构 | 第16-17页 |
·番茄花叶病毒研究概况 | 第17-19页 |
·ToMV的生物学特性 | 第17-18页 |
·ToMV的基因组结构 | 第18-19页 |
·酵母双杂交技术的应用研究进展 | 第19-22页 |
·传统酵母双杂交技术 | 第19-20页 |
·Cyto Trap酵母双杂交系统 | 第20-21页 |
·酵母双杂交技术的应用现状 | 第21-22页 |
·酵母双杂交技术在植物病毒学中的应用 | 第22页 |
·本课题的主要目的和研究方法 | 第22-24页 |
第二章 诱饵载体的构建及验证 | 第24-39页 |
·材料 | 第24-27页 |
·本实验所用的菌株和质粒载体 | 第24-25页 |
·常用试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
·酵母常用试剂及培养基的配制 | 第26页 |
·主要仪器设备 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-32页 |
·目的片段的制备 | 第27-29页 |
·诱饵载体的制备 | 第29-30页 |
·诱饵菌株转录自激活性及毒性的检测 | 第30-32页 |
·结果与分析 | 第32-38页 |
·ToMV CP,MP和CMV 2b基因的扩增 | 第32-34页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第34-36页 |
·酵母菌株cdc25H的表型验证 | 第36页 |
·诱饵蛋白毒性及转录活性的检测分析 | 第36-38页 |
·小结与讨论 | 第38-39页 |
第三章 加工番茄cDNA文库制备 | 第39-45页 |
·材料 | 第39页 |
·加工番茄的组织样品 | 第39页 |
·常用试剂及试剂盒 | 第39页 |
·引物 | 第39页 |
·方法 | 第39-42页 |
·接种CMV和ToMV | 第39-40页 |
·加工番茄总RNA提取和mRNA分离纯化 | 第40页 |
·加工番茄文库双链cDNA的合成 | 第40-41页 |
·cDNA末端的钝化及接头的连接 | 第41页 |
·EcoRⅠ末端的磷酸化及酶切 | 第41页 |
·cDNA纯化回收与pMyr载体的连接及转化 | 第41页 |
·cDNA文库的鉴定与保存和扩增文库滴度测定 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-44页 |
·总RNA的提取及mRNA的分离 | 第42页 |
·双链cDNA的合成纯化结果 | 第42-43页 |
·库容量、插入片段的重组率和大小 | 第43页 |
·文库的扩增及滴度检测 | 第43-44页 |
·小结与讨论 | 第44-45页 |
第四章 酵母双杂交筛选与CP,MP,2b相互作用的基因 | 第45-55页 |
·材料 | 第45页 |
·菌株、质粒与载体 | 第45页 |
·主要试剂及培养基 | 第45页 |
·方法 | 第45-48页 |
·用共转化方法筛选与CP,MP,2b互作的基因 | 第45页 |
·对照菌株的小量转化 | 第45-46页 |
·阳性克隆的初步筛选与鉴定 | 第46-48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·共转化结果 | 第48-49页 |
·菌落PCR鉴定结果 | 第49-50页 |
·阳性克隆质粒酶切鉴定结果 | 第50-51页 |
·阳性克隆测序及序列比对结果 | 第51-53页 |
·小结与讨论 | 第53-55页 |
第五章 结果与讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67-68页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第68页 |