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棉花三个SAUR基因的克隆及其功能分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
本文主要缩略词第13-14页
第一部分 文献综述第14-34页
 第一章 棉花纤维伸长发育的研究进展第14-26页
  1 棉花纤维生长模式第15-19页
   ·纤维细胞扩散生长模式第15-16页
   ·纤维细胞尖端生长模式第16-18页
   ·纤维细胞线性生长模式第18-19页
  2 棉花纤维伸长发育相关基因的研究进展第19-26页
   ·膨压和渗透压相关基因第19页
   ·细胞骨架相关基因第19-21页
   ·细胞壁结构相关基因第21-22页
   ·脂类合成相关基因第22页
   ·激素相关基因第22-26页
     ·生长素相关基因第22-23页
     ·其他激素相关基因第23-26页
 第二章 生长素调控的研究进展第26-32页
  1 生长素的合成和运输第26-27页
   ·生长素的合成第26-27页
   ·生长素的运输第27页
  2 生长素的信号转导第27-30页
   ·生长素信号途径第27-28页
   ·生长素响应基因第28-30页
     ·Aux/IAA家族基因第28-29页
     ·GH3家族基因第29页
     ·SAUR家族基因第29-30页
     ·生长素响应因子(ARFs)第30页
  3 生长素与植物细胞伸长生长第30-32页
 本研究的目的意义第32-34页
第二部分 研究报告第34-98页
 第三章 棉花SAUR家族基因的挖掘及3个SAUR基因的克隆第34-58页
  1 材料与方法第35-40页
   ·材料第35页
     ·植物材料第35页
     ·菌株与载体第35页
     ·生化试剂第35页
     ·PCR引物第35页
   ·方法第35-40页
     ·棉花基因组SAUR家族基因成员分析第35-36页
     ·目的基因cDNA全长的克隆第36-39页
       ·PCR扩增反应第36-37页
       ·PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测及目的条带回收第37页
       ·回收产物连接、转化及测序第37-39页
       ·含目的基因的质粒提取第39页
     ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2的序列分析第39-40页
  2 结果与分析第40-55页
   ·棉花基因组SAUR家族基因成员分析第40-45页
     ·棉花SAUR家族基因的基因组分析第40页
     ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2染色体定位第40-45页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2的cDNA全长扩增第45-48页
     ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2芯片分析结果第45-46页
     ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2的PCR扩增结果第46-48页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2的序列分析第48-55页
     ·分子量和等电点分析第48页
     ·结构域分析第48-49页
     ·多序列比对分析第49-52页
     ·GhSAURs蛋白与模式植物拟南芥和水稻的进化关系第52-53页
     ·两个GhSAUR-likes启动子顺式元件分析第53-55页
  3 讨论第55-58页
   ·棉花SAUR家族基因成员与基因组结构第55页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2与其他物种中同源基因的关系第55-56页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2响应因子分析第56-58页
 第四章 GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2时空表达特征与亚细胞定位分析第58-70页
  1 实验方法第58-62页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2时空表达特征分析第58-60页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2瞬时表达分析第60-62页
     ·瞬时表达载体的构建第60-61页
     ·基因枪法转化第61-62页
  2 结果与分析第62-68页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2时空表达特性分析第62-66页
     ·棉花不同组织RNA的提取第62-64页
     ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2时空表达特征分析第64-66页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2瞬时表达分析第66-68页
  3 讨论第68-70页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2时空表达分析第68页
   ·GhSAUR68、GhSAUR-like1和GhSAUR-like2瞬时表达分析第68-70页
 第五章 GhSAUR68和GhSAUR-like2拟南芥转基因功能验证第70-90页
  1 材料与方法第70-76页
   ·材料第70-71页
     ·植物材料第70页
     ·菌株、载体与仪器设备第70-71页
     ·常用试剂第71页
     ·引物第71页
   ·方法第71-76页
     ·植物过表达载体的构建第71-72页
     ·植物过表达载体的农杆菌转化第72-73页
     ·拟南芥转基因第73-76页
  2 结果与分析第76-87页
   ·3个SAUR基因植物过表达载体的构建第76-77页
   ·获得拟南芥转基因T_0代第77-82页
     ·GhSAUR68转基因拟南芥植株的获得及表型观察第77-80页
       ·GhSAUR68转基因拟南芥植株的获得第77-79页
       ·GhSAUR68转基因阳性苗的表型观察第79-80页
     ·GhSAUR-like2转基因拟南芥植株的获得及表型观察第80-82页
       ·GhSAUR68-like2转基因拟南芥植株的获得第80-81页
       ·GhSAUR68-like2转基因阳性苗表型观察第81-82页
   ·拟南芥突变体表型及对生长素和赤霉素的响应第82-87页
     ·拟南芥同源基因启动子区应答元件分析第82-83页
     ·saur68表型观察及对生长素和赤霉素的响应第83-85页
     ·saur-like2表型观察及对生长素和赤霉素的响应第85-87页
  3 讨论第87-90页
 第六章 GhSAUR-like2棉花转基因功能验证第90-98页
  1 材料与方法第90-92页
   ·材料第90-91页
   ·棉花转基因方法第91-92页
  2 结果与分析第92-96页
   ·用3个不同启动子的棉花转基因过程第92-93页
   ·GhSAUR-like2转基因棉花胚性愈伤组织的获得第93-94页
   ·GhSAUR-like2转基因棉花再生植株的获得第94-96页
  3 讨论第96-98页
第三部分 全文结论第98-100页
参考文献第100-114页
附录第114-120页
致谢第120页

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