摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-25页 |
·铁皮石斛研究概况 | 第11-14页 |
·铁皮石斛的分类地位与分布 | 第11页 |
·铁皮石斛的生境与形态特征 | 第11-12页 |
·铁皮石斛的研究现状 | 第12-14页 |
·药用植物转录组学的研究进展 | 第14-16页 |
·转录组学及其研究方法 | 第14-15页 |
·药用植物转录组学的研究意义 | 第15页 |
·转录组测序技术在药用植物研究中的应用 | 第15-16页 |
·铁皮石斛的转录组学研究进展 | 第16页 |
·药用植物黄酮类化合物生物代谢途径的研究进展 | 第16-22页 |
·黄酮类化合物及其分布 | 第16-17页 |
·黄酮类化合物的结构及分类 | 第17页 |
·黄酮类化合物的生理和药理功能研究 | 第17-18页 |
·黄酮类化合物生物合成途径及相关功能基因的研究 | 第18-20页 |
·查尔酮合成酶基因的研究进展 | 第20-21页 |
·石斛属植物中黄酮类化合物的研究 | 第21-22页 |
·研究目的和意义 | 第22-23页 |
·研究内容 | 第23-24页 |
·技术路线 | 第24-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-47页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·植物材料 | 第25页 |
·仪器设备 | 第25-26页 |
·酶与分子生物学试剂 | 第26-27页 |
·菌株与载体 | 第27页 |
·铁皮石斛转录组测序 | 第27-29页 |
·铁皮石斛样品的采集与处理 | 第27页 |
·铁皮石斛总RNA的提取 | 第27-29页 |
·转录组文库的建立与测序 | 第29页 |
·铁皮石斛CHS基因的克隆及原核表达 | 第29-43页 |
·铁皮石斛总RNA的提取 | 第29页 |
·CHS基因保守片段cDNA序列的获得 | 第29-33页 |
·DcCHS基因全长cDNA序列的获得 | 第33-39页 |
·DcCHS基因原核表达载体的构建及检测 | 第39-43页 |
·铁皮石斛黄酮类化合物合成相关基因的荧光定量表达 | 第43-47页 |
·材料选取 | 第43页 |
·不同组织总RNA的提取 | 第43-44页 |
·DcF3H和DcDFR基因保守序列的克隆 | 第44-45页 |
·DcCHS、DcF3H和DcDFR基因的荧光定量表达 | 第45-47页 |
第三章 铁皮石斛转录组测序结果分析 | 第47-56页 |
·RNA样品的检测 | 第47-48页 |
·转录组测序结果的组装与注释 | 第48-50页 |
·差异表达基因分析 | 第50-53页 |
·差异表达基因GO功能分析 | 第51-52页 |
·差异表达基因Pathway功能分析 | 第52-53页 |
·黄酮类化合物生物合成相关基因的筛选 | 第53-56页 |
第四章 铁皮石斛CHS基因的克隆及原核表达分析 | 第56-69页 |
·铁皮石斛总RNA检测 | 第56页 |
·DcCHS基因的cDNA序列 | 第56-59页 |
·DcCHS基因的生物信息学分析 | 第59-65页 |
·DcCHS基因cDNA全长序列分析 | 第59-61页 |
·DcCHS基因编码的氨基酸及蛋白特性分析 | 第61-64页 |
·DcCHS基因的进化分析 | 第64-65页 |
·PET32a-DcCHS原核表达载体的构建 | 第65-66页 |
·DcCHS蛋白的诱导表达和酶活鉴定 | 第66-69页 |
第五章 DcCHS、DcF3H和DcDFR基因的荧光定量表达分析 | 第69-77页 |
·RNA的检测 | 第69-70页 |
·DcF3H和DcDFR基因的保守序列 | 第70-71页 |
·DcCHS、DcF3H和DcDFR基因的荧光定量表达分析 | 第71-77页 |
第六章 讨论 | 第77-81页 |
·转录组测序与功能注释的探讨 | 第77-78页 |
·铁皮石斛黄酮类化合物生物合成相关基因的探讨 | 第78页 |
·DcCHS基因及其进化的探讨 | 第78-79页 |
·DcCHS基因的原核表达及产物检测的探讨 | 第79页 |
·利用荧光定量PCR法检测基因表达的探讨 | 第79-81页 |
第七章 总结与展望 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-93页 |
致谢 | 第93-95页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第95-96页 |