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宿主细胞调控HIV-1复制和潜伏的分子机制

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一部分:宿主因子Naf1调控HIV-1 复制第9-36页
 1 引言第9-12页
 2 实验材料和方法第12-18页
   ·细胞与病毒第12页
   ·质粒构建第12-13页
   ·细胞质粒转染和病毒感染实验第13页
   ·HIV-1 RNA的核质分离第13-14页
   ·免疫印迹(Western blotting)第14页
   ·免疫共沉淀(Co-IP)第14-15页
   ·RNA提取和反转录第15-16页
   ·荧光实时定量PCR(qRT-PCR)第16页
   ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第16-17页
   ·细胞毒性试验( MTT Assay)第17页
   ·激光共聚焦显微镜实验和图像分析第17页
   ·数据统计分析第17-18页
 3 实验结果第18-28页
   ·Naf1是HIV-1 复制依赖因子第18-20页
   ·Naf1能促进HIV-1 不完全剪切gag mRNA的出核第20-22页
   ·Naf1与CRM1相互作用对Naf1的功能至关重要第22-25页
   ·NES和NLS序列的突变削弱Naf1增强HIV-1 复制的功能第25-28页
 4 结论和讨论第28-30页
 5 参考文献第30-36页
第二部分:树突状细胞激活潜伏HIV-1 的机制研究第36-61页
 1 引言第36-39页
 2 实验材料和方法第39-42页
   ·细胞与病毒第39页
   ·抗体和试剂第39-40页
   ·HIV-1 潜伏C11细胞的激活第40页
   ·siRNA干扰实验第40页
   ·流式细胞术(FACS)第40-41页
   ·RNA提取和反转录第41页
   ·荧光实时定量PCR(qRT-PCR)第41页
   ·数据统计分析第41-42页
 3 实验结果第42-51页
   ·树突状细胞能激活潜伏HIV-1第42-44页
   ·LPS刺激mDCs产生TNF-α 激活C11中潜伏HIV-1第44页
   ·iDCs通过TNF-α 依赖机制激活C11中潜伏HIV-1第44-46页
   ·iDCs通过CD40-CD40L信号通路激活C11中潜伏HIV-1第46-49页
   ·AIDS相关病原体诱导iDCs成熟第49-51页
 4 结论和讨论第51-55页
 5 参考文献第55-61页
专业综述第61-99页
 参考文献第77-99页
攻读学位期间发表的学术论文第99-100页
附录第100-102页
致谢第102-104页

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