| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·研究背景 | 第12页 |
| ·海水盐度对刺参的影响 | 第12-14页 |
| ·盐度胁迫对刺参生长发育、存活率和行为的影响 | 第12-13页 |
| ·盐度胁迫对刺参非特异性免疫的影响 | 第13-14页 |
| ·盐度对刺参渗透压及呼吸代谢的影响 | 第14页 |
| ·刺参盐度相关基因的研究进展 | 第14-21页 |
| ·溶菌酶的研究 | 第14-16页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase的研究 | 第16-19页 |
| ·NKCC基因的研究 | 第19-21页 |
| ·RNAi的研究进展 | 第21-23页 |
| ·RNAi的原理 | 第21-22页 |
| ·RNAi在水产动物研究中的应用 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第23-24页 |
| 第二章 刺参盐度相关基因RNA干扰重组质粒的构建及筛选 | 第24-40页 |
| ·材料与试剂 | 第24-25页 |
| ·动物材料 | 第24页 |
| ·质粒和菌种 | 第24页 |
| ·培养基和溶液配方 | 第24-25页 |
| ·其他试验试剂及器材 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-33页 |
| ·RNA干扰重组质粒的构建 | 第25-28页 |
| ·RNA干扰重组质粒的初筛 | 第28-30页 |
| ·进一步验证RNA干扰重组质粒对靶基因的干扰效果 | 第30-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·RNA干扰重组质粒的鉴定与测序 | 第33-35页 |
| ·溶菌酶基因RNA干扰重组质粒筛选结果 | 第35-36页 |
| ·Na~+,K~+-ATPae基因RNA干扰重组质粒筛选结果 | 第36-37页 |
| ·NKCC1基因RNA干扰重组质粒筛选结果 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 刺参体内RNA干扰方法的初步研究 | 第40-48页 |
| ·材料与试剂 | 第40页 |
| ·动物材料 | 第40页 |
| ·质粒和菌种 | 第40页 |
| ·培养基和溶液配方 | 第40页 |
| ·实验试剂及器材 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·RNA干扰重组质粒的制备 | 第40-41页 |
| ·从不同部位注射RNA干扰重组质粒 | 第41页 |
| ·以不同剂量注射RNA干扰重组质粒 | 第41页 |
| ·测定转染后不同时间点溶菌酶基因的表达量 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-45页 |
| ·从不同部位注射Rip-LYZ-2 后溶菌酶基因的表达量变化 | 第42-43页 |
| ·不同剂量条件下刺参溶菌酶基因的相对表达量 | 第43页 |
| ·转染后不同时间点刺参溶菌酶基因的表达量变化 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 刺参LYZ、NKA和NKCC1基因的体内RNA干扰 | 第48-68页 |
| ·材料与试剂 | 第48页 |
| ·动物材料 | 第48页 |
| ·质粒和菌种 | 第48页 |
| ·培养基和溶液配方 | 第48页 |
| ·试验试剂和器材 | 第48页 |
| ·试验方法 | 第48-52页 |
| ·RNA干扰重组质粒的制备 | 第48-49页 |
| ·RNA干扰重组质粒转染刺参 | 第49页 |
| ·检测转染后体腔液中靶基因的表达量变化 | 第49-50页 |
| ·检测转染后相关酶活性及离子浓度 | 第50-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-64页 |
| ·RNA干扰重组质粒的制备 | 第52页 |
| ·溶菌酶基因体内RNA干扰结果 | 第52-56页 |
| ·Na~+,K~+-ATPae基因体内RNA干扰结果 | 第56-61页 |
| ·NKCC1基因体内RNA干扰结果 | 第61-64页 |
| ·讨论 | 第64-68页 |
| ·刺参溶菌酶基因体内RNA干扰结果分析 | 第64-65页 |
| ·刺参Na~+,K~+-ATPase基因体内RNA干扰结果分析 | 第65-66页 |
| ·刺参NKCC1基因体内RNA干扰结果分析 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-82页 |
| 攻读学位期间发表的论文目录 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
