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草酸青霉β-葡萄糖苷酶的过表达及纤维素酶新调控位点的筛选

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
符号说明及缩略词第15-16页
第一章 绪论第16-28页
   ·降解木质纤维素微生物的种类第16-18页
     ·纤维素降解古菌第16-17页
     ·纤维素降解细菌第17页
     ·纤维素降解真菌第17-18页
   ·木质纤维素降解酶系的组成第18-20页
     ·纤维素酶的分类第19-20页
     ·半纤维素酶的种类第20页
   ·β-葡萄糖苷酶第20-23页
     ·β-葡萄糖苷酶的分类第21页
     ·β-葡萄糖苷酶的结构第21-22页
     ·β-葡萄糖苷酶的理化性质第22页
     ·β-葡萄糖苷酶的底物特异性第22-23页
   ·丝状真菌木质纤维素酶的合成调控机制研究进展第23-26页
     ·碳源作为信号的识别和传递第23-24页
     ·转录水平的调控第24-25页
     ·其他因素对纤维素酶合成调控的影响第25-26页
   ·本论文的立题依据和研究内容第26-28页
第二章 草酸青霉β-葡萄糖苷酶的同源过表达第28-46页
 引言第28页
   ·材料和方法第28-38页
     ·菌株、培养基和培养方法第28-29页
     ·常用缓冲液和储备液第29-31页
     ·主要生化试剂和仪器第31页
     ·草酸青霉基因组DNA的提取第31-32页
     ·β-葡萄糖苷酶过表达菌株的构建第32-36页
     ·β-葡萄糖苷酶基因转录水平的测定第36-37页
     ·木质纤维素酶活力测定第37-38页
   ·结果与讨论第38-43页
     ·草酸青霉114-2β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列分析第38-39页
     ·β-葡萄糖苷酶基因、抗性基因和启动子的克隆第39-40页
     ·β-葡萄糖苷酶基因过表达盒的构建第40页
     ·过表达菌株的获得和验证第40-41页
     ·过表达菌株β-葡萄糖苷酶基因转录水平的检测第41-42页
     ·对木质纤维素酶活力的影响第42-43页
 本章小结第43-46页
第三章 黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因在草酸青霉中的异源表达第46-54页
 引言第46页
   ·材料和方法第46-49页
     ·菌株、培养基和培养方法第46页
     ·常用缓冲液和储备液第46-47页
     ·高产β-葡萄糖苷酶菌株的构建第47-48页
     ·木质纤维素酶活测定第48页
     ·高产菌株发酵液中添加β-葡萄糖苷酶粗酶液实验第48-49页
   ·结果与讨论第49-52页
     ·黑曲霉bgl1基因过表达盒的构建第49页
     ·过表达菌株的获得和验证第49-50页
     ·最优转化子筛选第50-51页
     ·糖化实验第51-52页
 本章小结第52-54页
第四章 草酸青霉JU-A10-T突变位点的系统分析第54-70页
 引言第54页
   ·材料和方法第54-60页
     ·菌株、培养基和培养方法第54-55页
     ·常用缓冲液和储备液第55页
     ·差异位点序列比对第55-56页
     ·突变位点敲除株的构建第56-59页
     ·纤维素平板表型分析第59页
     ·木质纤维素酶活力测定第59-60页
     ·不同碳源对A突变株的影响第60页
     ·A突变株纤维素酶基因的转录水平检测第60页
     ·A区域在基因组上的高度保守性第60页
   ·结果与讨论第60-68页
     ·突变位点敲除株的构建第60-62页
     ·纤维素平板表型分析第62-63页
     ·木质纤维素酶活力测定第63-64页
     ·A突变株纤维素酶基因的转录水平检测第64-65页
     ·不同碳源条件下A突变株的淀粉酶活第65-66页
     ·A区域的特殊性第66-68页
 本章小结第68-70页
论文创新性结果与展望第70-72页
参考文献第72-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80-82页
致谢第82-83页
学位论文评阅及答辩情况表第83页

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