| 英文缩略词 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 前言 | 第8-13页 |
| 第一章 Pin1 在不同肝癌细胞系中的表达 | 第13-27页 |
| 材料和方法 | 第13-22页 |
| 1. 实验材料和仪器 | 第13-16页 |
| ·主要试剂及其来源 | 第13-14页 |
| ·主要设备仪器及其来源 | 第14-15页 |
| ·细胞株 | 第15页 |
| ·引物 | 第15页 |
| ·试剂配制 | 第15-16页 |
| 2. 方法 | 第16-21页 |
| ·细胞培养 | 第16-17页 |
| ·细胞总蛋白的提取及浓度测定 | 第17-18页 |
| ·Western Blot分析 | 第18-19页 |
| ·Real-time PCR实验 | 第19-21页 |
| 3.统计学分析 | 第21-22页 |
| 结果 | 第22-24页 |
| 1. Pin1 蛋白在不同肝癌细胞系的相对表达水平. | 第22页 |
| 2. Pin1 mRNA在肝癌细胞株中的相对表达水平 | 第22-24页 |
| ·RNA样品鉴定 | 第22-24页 |
| ·Real-time PCR反应条件及特异性判定 | 第24页 |
| ·Real-time PCR结果分析 | 第24页 |
| 讨论 | 第24-27页 |
| 第二章 靶向调控Pin1 的miRNA筛选及验证 | 第27-48页 |
| 材料和方法 | 第27-39页 |
| 1. 材料 | 第27-31页 |
| ·主要试剂及其来源 | 第27-28页 |
| ·主要设备仪器及其来源 | 第28-29页 |
| ·细胞株 | 第29页 |
| ·引物 | 第29-30页 |
| ·试剂配制 | 第30-31页 |
| 2. 方法 | 第31-39页 |
| ·靶基因Pin1的生物信息学预测 | 第31页 |
| ·细胞培养 | 第31页 |
| ·细胞转染 | 第31-32页 |
| ·细胞总蛋白提取及浓度测定 | 第32页 |
| ·双荧光素酶报告基因质粒构建 | 第32-38页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第38页 |
| ·Western blot验证 | 第38-39页 |
| 3.统计学分析 | 第39页 |
| 结果 | 第39-45页 |
| 1. 靶向调控Pin1 的miRNAs的生物信息学预测 | 第39-40页 |
| 2. 双荧光素酶报告基因质粒的构建 | 第40-42页 |
| ·pmir GLO-Pin1-3’UTR-wt质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·pmir GLO-Pin1-3’UTR-mut质粒的构建 | 第41-42页 |
| 3. 双荧光素酶报告基因实验 | 第42页 |
| 4. Western Blot实验验证 | 第42-43页 |
| 5. 双荧光素酶报告基因突变回复实验 | 第43-45页 |
| 讨论 | 第45-48页 |
| 总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 综述 | 第61-72页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
