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海洋细菌来源的高温碱性普鲁兰酶及蛋白酶的克隆表达及酶学性质分析

摘要第1-12页
Abstract第12-14页
第一章 前言第14-30页
   ·嗜热微生物与嗜热酶第14页
   ·普鲁兰酶第14-18页
     ·普鲁兰酶的分类第15-16页
     ·普鲁兰酶的研究概况第16-17页
     ·普鲁兰酶的定位和分泌第17页
     ·普鲁兰酶的应用第17-18页
   ·蛋白酶第18-22页
     ·蛋白酶概况第18-19页
     ·蛋白酶的分类第19-21页
     ·蛋白酶在工业领域的应用第21-22页
   ·极端酶的异源表达策略第22-29页
     ·大肠杆菌表达系统第22-26页
     ·枯草芽孢杆菌表达系统第26-29页
   ·课题的研究意义第29-30页
第二章 高温普鲁兰酶产生菌的筛选及酶的异源表达第30-62页
 引言第30页
   ·实验材料第30-34页
     ·菌株第30页
     ·培养基第30-31页
     ·主要试剂及其配制过程第31-33页
     ·主要仪器第33-34页
   ·实验方法第34-42页
     ·普鲁兰酶高产菌株的筛选第34页
     ·普鲁兰酶Pul A的异源表达及其纯化第34-37页
     ·普鲁兰酶Pul A的酶学性质研究第37-40页
     ·普鲁兰酶发酵培养基的优化第40-41页
     ·普鲁兰酶酶制剂的制备第41-42页
   ·实验结果与分析第42-59页
     ·产酶菌株的筛选第42-43页
     ·普鲁兰酶的异源表达与纯化第43-47页
     ·普鲁兰酶Pul A的酶学性质研究第47-57页
     ·普鲁兰酶发酵培养基的优化第57-58页
     ·普鲁兰酶的酶保护剂第58-59页
   ·小结与讨论第59-62页
     ·本章小结第59-60页
     ·讨论第60-62页
第三章 蛋白酶VFP的异源表达及表达策略的优化第62-91页
 引言第62页
   ·实验材料第62-64页
     ·菌株第62页
     ·主要试剂第62-64页
   ·实验方法第64-72页
     ·蛋白酶VFP的分离纯化与鉴定第64-66页
     ·蛋白酶VFP的异源表达第66-67页
     ·蛋白酶VFP表达策略的优化第67-69页
     ·蛋白酶VFP酶学性质的分析第69-71页
     ·优化后的表达策略在其他蛋白表达上的应用第71-72页
   ·实验结果与分析第72-87页
     ·蛋白酶VFP的分离纯化与鉴定第72-77页
     ·蛋白酶VFP表达策略的优化第77-81页
     ·蛋白酶酶学性质的分析第81-86页
     ·优化后的表达策略在其他蛋白酶表达上的应用第86-87页
   ·小结与讨论第87-91页
     ·本章小结第87-88页
     ·讨论第88-91页
第四章 蛋白酶Calolysin在大肠杆菌及枯草芽孢杆菌中的表达第91-113页
 引言第91页
   ·实验材料第91-92页
     ·菌株第91页
     ·培养基第91-92页
   ·实验方法第92-96页
     ·菌株Caloranaerobacter sp. TR13的培养与基因组DNA的提取第92页
     ·蛋白酶Calolysin基因序列的分析第92页
     ·蛋白酶Calolysin在大肠杆菌中的表达第92-93页
     ·蛋白酶Calolysin在枯草芽孢杆菌中的表达第93-95页
     ·重组蛋白酶Calolysin的酶学性质第95-96页
   ·实验结果与分析第96-110页
     ·蛋白酶Calolysin基因序列的分析第96-97页
     ·蛋白酶Calolysin在大肠杆菌中的表达第97-100页
     ·蛋白酶在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB800N中的表达第100-102页
     ·蛋白酶Calolysin的酶学性质第102-110页
   ·小结与讨论第110-113页
     ·本章小结第110-112页
     ·讨论第112-113页
第五章 总结与展望第113-116页
   ·总结第113-114页
   ·展望第114-116页
参考文献第116-123页
附录第123-124页
致谢第124-125页

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