| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-24页 |
| ·艾滋病及其流行病学 | 第13-14页 |
| ·HIV 研究概况 | 第14-17页 |
| ·HIV 的生物学特性及形态结构 | 第14页 |
| ·HIV 基因组结构及编码蛋白功能 | 第14-15页 |
| ·HIV 的理化特性 | 第15-16页 |
| ·HIV 传染源和传播途径 | 第16页 |
| ·HIV 致病机制 | 第16-17页 |
| ·艾滋病疫苗的研发 | 第17-19页 |
| ·灭活和减毒疫苗 | 第17-18页 |
| ·纯化的蛋白用做疫苗 | 第18页 |
| ·病毒核心作为疫苗 | 第18-19页 |
| ·其他疫苗策略 | 第19页 |
| ·SHIV 概述 | 第19-21页 |
| ·SHIV 的产生 | 第19-20页 |
| ·SHIV 模型构建过程及特性 | 第20-21页 |
| ·SHIV 的应用 | 第21页 |
| ·SHIV 的检测 | 第21-22页 |
| ·SHIV p27 蛋白概述 | 第22-23页 |
| ·研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-39页 |
| ·抗体、菌株与质粒 | 第24页 |
| ·主要酶类及生化试剂 | 第24-25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第27页 |
| ·单克隆抗体的预处理 | 第27页 |
| ·单克隆抗体纯化 | 第27页 |
| ·单克隆抗体对抗原结合位点的结合分析 | 第27-29页 |
| ·间接ELISA 实验操作步骤 | 第27-28页 |
| ·酶标抗体最适稀释度的确定 | 第28页 |
| ·腹水抗体浓度的确定 | 第28页 |
| ·p27 抗原竞争ELISA 监测方法的建立 | 第28-29页 |
| ·p27 基因的分段克隆 | 第29-30页 |
| ·引物设计与合成 | 第29页 |
| ·p27-a、p27-b 和p27-c 基因的PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·目的基因片段的回收 | 第30页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第30-33页 |
| ·表达载体pET-32a 的制备 | 第30页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·目的片段与表达载体的连接 | 第31页 |
| ·目的片段与表达载体连接产物的转化 | 第31页 |
| ·转化子的筛选与鉴定 | 第31-33页 |
| ·p27 基因的分段表达 | 第33-34页 |
| ·重组质粒转化表达菌株BL21（DE3） | 第33页 |
| ·重组菌株的诱导表达 | 第33页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE 和Western blot 检测 | 第33-34页 |
| ·短肽的表达 | 第34-39页 |
| ·短肽的设计 | 第34-37页 |
| ·短肽表达质粒的构建 | 第37页 |
| ·短肽重组质粒的转化 | 第37页 |
| ·短肽的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·短肽的SDS-PAGE 分析 | 第38页 |
| ·短肽的Western -Blot 鉴定 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第39页 |
| ·单克隆抗体对抗原结合位点结合分析 | 第39-40页 |
| ·酶标抗体最适稀释度的确定 | 第39-40页 |
| ·腹水抗体浓度的确定 | 第40页 |
| ·p27 抗原的竞争ELISA 检测方法的建立 | 第40页 |
| ·p27-a、p27-b 和p27-c 基因的PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第41页 |
| ·融合蛋白表达 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白Western-Blot 鉴定 | 第42-43页 |
| ·短肽的SDS-PAGE 分析 | 第43页 |
| ·短肽的Western blot 鉴定 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第45-46页 |
| ·表达条件的常规优化 | 第46页 |
| ·寡核苷酸链制备 | 第46页 |
| ·单克隆抗体结合表位的鉴定 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
