| 摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1. 引言 | 第11-22页 |
| ·病毒的生物学特性 | 第11-12页 |
| ·形态特征 | 第11页 |
| ·BVDV 分型 | 第11-12页 |
| ·BVDV 基因组结构及其功能 | 第12-15页 |
| ·BVDV 非翻译区 | 第12-13页 |
| ·BVDV 结构蛋白 | 第13-14页 |
| ·BVDV 非结构蛋白 | 第14-15页 |
| ·牛病毒性腹泻/黏膜病的类型 | 第15-16页 |
| ·急性感染 | 第15页 |
| ·先天性感染 | 第15页 |
| ·持续型感染 | 第15-16页 |
| ·黏膜病 | 第16页 |
| ·牛病毒性腹泻/黏膜病的流行状况 | 第16-18页 |
| ·诊断方法 | 第18-20页 |
| ·抗原诊断方法 | 第18-19页 |
| ·牛病毒性腹泻病血清学检测方法 | 第19-20页 |
| ·BVDV 清除计划 | 第20-21页 |
| ·本实验的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-30页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·质粒、菌株和血清 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·表位的选择及引物的设计 | 第23页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第23-26页 |
| ·nN 蛋白的原核表达和鉴定 | 第26-27页 |
| ·牛 BVDV 抗体间接 ELISA 检测方法的标准化 | 第27-28页 |
| ·特异性试验 | 第28页 |
| ·重复性试验 | 第28-29页 |
| ·与同类商品化试剂盒的对比 | 第29页 |
| ·BVDV NS3 表位串联蛋白抗体间接 ELISA 方法的初步应用 | 第29-30页 |
| 3. 结果与分析 | 第30-39页 |
| ·表位串联重组载体的构建 | 第30-32页 |
| ·串联蛋白的诱导表达和抗原性鉴定 | 第32-33页 |
| ·串联蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·串联蛋白的western blot 鉴定 | 第33页 |
| ·重组蛋白 EX6N 的可溶性分析与纯化 | 第33-34页 |
| ·牛 BVDV 抗体间接 ELISA 方法的建立及标准化 | 第34-36页 |
| ·抗原和被检血清最佳稀释度的测定 | 第34页 |
| ·包被液的选择 | 第34页 |
| ·最佳封闭液的选择 | 第34页 |
| ·最佳酶标抗体工作浓度的选择 | 第34-35页 |
| ·最佳被检血清和酶标抗体作用时间的选择 | 第35-36页 |
| ·最佳显色时间的确定 | 第36页 |
| ·BVDV 间接 ELISA 临界值的确定及阳性结果的判定 | 第36-37页 |
| ·BVDV 抗体间接 ELISA 特异性检测 | 第37页 |
| ·BVDV 抗体间接 ELISA 重复性试验 | 第37页 |
| ·BVDV 抗体间接 ELISA 与同类商品化试剂盒的对比 | 第37-38页 |
| ·BVDV 抗体间接 ELISA 方法初步应用 | 第38-39页 |
| 4. 讨论 | 第39-42页 |
| ·串联技术的优点 | 第39页 |
| ·检测抗原的选择 | 第39-40页 |
| ·表达形式的优化及纯化 | 第40页 |
| ·ELISA 条件的选择 | 第40-42页 |
| 5. 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第48页 |
