| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-23页 |
| ·牡丹概况 | 第9页 |
| ·碳水化合物对植物开花的影响 | 第9-11页 |
| ·碳水化合物向花器官的运输与转化 | 第9-11页 |
| ·糖在花器官中的积累 | 第11页 |
| ·高等植物蔗糖转运蛋白研究进展 | 第11-18页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白的分类 | 第13-14页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白的结构 | 第14-15页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白的功能与定位 | 第15-18页 |
| ·牡丹相关基因的克隆与表达调控 | 第18-20页 |
| ·蔗糖转运蛋白基因的克隆与表达调控 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量在植物基因表达中的应用 | 第21-23页 |
| 2 引言 | 第23-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株与载体 | 第24页 |
| ·工具酶及生化试剂 | 第24页 |
| ·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·PCR 引物 | 第25-26页 |
| ·引物合成与测序 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-36页 |
| ·总 RNA 提取及鉴定 | 第26-27页 |
| ·试剂和器皿的准备 | 第26页 |
| ·试验准备 | 第26页 |
| ·用改良的 CTAB 法提取总 RNA | 第26-27页 |
| ·总 RNA 质量鉴定 | 第27页 |
| ·反转录 | 第27-28页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因中间片段克隆 | 第28-30页 |
| ·设计兼并引物，进行 RT-PCR 扩增中间片段 | 第28页 |
| ·中间片段产物回收与纯化 | 第28-29页 |
| ·中间片段与 T 载体的快速链接 | 第29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·感受态细胞的转化与鉴定 | 第29-30页 |
| ·大量法提取质粒 DNA | 第30页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因 3'-RACE 克隆 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·巢式 PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物回收与纯化 | 第31页 |
| ·回收产物与 T 载体快速链接 | 第31页 |
| ·感受态制备 | 第31页 |
| ·感受态细胞的转化与鉴定 | 第31页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因 5'-RACE 克隆 | 第31-33页 |
| ·引物设计 | 第31页 |
| ·5′-RACE-Ready cDNA 的合成 | 第31-32页 |
| ·巢式 PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR 产物回收 | 第33页 |
| ·回收产物与 T 载体快速链接 | 第33页 |
| ·感受态制备 | 第33页 |
| ·感受态细胞的转化与鉴定 | 第33页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因 cDNA 全长序列拼接 | 第33页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因序列分析 | 第33-34页 |
| ·实时荧光定量表达分析 | 第34-36页 |
| ·RNA 提取 | 第34页 |
| ·cDNA 的合成 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·RT-qPCR 反应条件 | 第34-35页 |
| ·RT-qPCR 表达分析 | 第35-36页 |
| 4 结果与分析 | 第36-49页 |
| ·RNA 质量及浓度检测 | 第36页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因克隆与序列分析 | 第36-41页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因中间片段的克隆与序列分析 | 第36-37页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因 3'-RACE 克隆与序列分析 | 第37-39页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因 5'-RACE 克隆与序列分析 | 第39-40页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因 ORF 阅读框分析 | 第40-41页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因同源性与进化树分析 | 第41-43页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因蛋白质结构预测 | 第43-45页 |
| ·实时荧光定量分析 | 第45-49页 |
| ·RNA 的提取 | 第45-46页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因引物的筛选 | 第46-47页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因的 RT-qPCR 的分析 | 第47-49页 |
| 5 结论与讨论 | 第49-50页 |
| ·结论 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因的克隆与功能分析 | 第49-50页 |
| ·牡丹 PsSUT1 基因的表达分析 | 第50页 |
| 6 下一步研究设想 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 英文摘要 | 第59页 |
