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H9N2亚型禽流感流行毒株的病毒特性及遗传演化研究

目录第1-7页
摘要第7-8页
文献综述第8-22页
 1 AIV 的概述第8-9页
   ·AIV 的分类及命名第8页
   ·AIV 的形态结构及特性第8-9页
     ·AIV 的形态结构及组成第8-9页
     ·AIV 的理化特性第9页
     ·AIV 的培养特性第9页
 2 流行病学第9-11页
   ·分布第9页
   ·易感动物第9-10页
   ·传播途径第10页
   ·流行季节第10页
   ·AIV 在宿主中流行特征第10-11页
     ·水禽与 AIV第10页
     ·人与 AIV第10-11页
     ·猪与 AIV第11页
 3 禽流感流行状况第11-12页
   ·国外流行状况第11-12页
   ·国内的流行状况第12页
 4 AIV 的变异研究进展第12-14页
   ·HA 是 AIV 毒力变异的主要决定因素第13-14页
     ·HA 裂解位点与 AIV 毒力的关系第13页
     ·HA 变异与病毒抗原性的改变第13-14页
     ·HA 受体结合位点的变异第14页
   ·NA 对 AlV 的毒力影响第14页
 5 禽流感的分离鉴定第14-16页
   ·病原学诊断方法第14-15页
   ·血清学方法第15页
     ·血凝(HA)、血凝抑制(HI)试验第15页
     ·琼脂凝胶扩散实验第15页
     ·酶联免疫吸附试验第15页
   ·分子生物学技术诊断第15-16页
     ·多重 PCR第15-16页
     ·实时荧光定量 RT-PCR第16页
     ·RT-PCR-酶联免疫吸附第16页
     ·逆转录环介导等温核酸扩增技术第16页
 6 禽流感疫苗研究进展第16-18页
   ·全病毒灭活疫苗第17页
   ·亚单位疫苗第17页
   ·重组活载体疫苗第17页
   ·减毒活流感病毒疫苗第17-18页
   ·核酸疫苗第18页
   ·表位疫苗第18页
 7 H9N2 亚型禽流感的研究进展第18-22页
试验一 2010-2012 年临床分离 AIV(H9N2)毒株的分离鉴定与 HA 和 NA 基因的进化分析第22-38页
 1 引言第22页
 2 材料第22-26页
   ·H9N2 AIV 分离毒株第22-25页
   ·阳性血清第25页
   ·SPF 鸡和 SPF 鸡胚第25页
   ·主要试剂第25页
   ·主要仪器第25-26页
 3 方法第26-30页
   ·H9N2 亚型禽流感毒株的分离鉴定和纯化第26-28页
     ·病料处理第26页
     ·鸡胚接种第26页
     ·血凝和血凝抑制试验第26-27页
     ·病毒的纯化第27页
     ·H9亚型AIV的分子生物学鉴定第27-28页
   ·临床分离株鸡胚半数感染量(EID50)的测定第28页
   ·动物回归试验第28页
   ·H9N2 亚型 AIV 临床分离株的 HA 基因和 NA 基因的 RT-PCR 扩增和序列测定第28-30页
   ·H9N2 亚型 AIV 分离株的 HA 基因和 NA 基因的序列测定和系统进化分析第30页
 4 结果与讨论第30-38页
   ·H9N2 亚型禽流感毒株的分离鉴定第30页
   ·动物回归试验结果第30页
   ·H9N2 亚型 AIV 分离株的 HA 基因系统进化分析第30-34页
     ·HA基因的核苷酸及其推算的氨基酸序列一致性分析第30-32页
     ·HA基因氨基酸序列差异性分析第32页
     ·HA 基因的核苷酸进化分析第32-34页
   ·H9N2 亚型 AIV 分离株的 NA 基因系统进化分析第34-36页
     ·NA基因的核苷酸及其推算的氨基酸序列一致性分析第34-35页
     ·NA基因的氨基酸序列差异性分析第35页
     ·NA基因的核苷酸进化分析及其推算的氨基酸序列进化分析第35-36页
   ·讨论第36-38页
试验二 2010-2012 年 H9N2 亚型临床分离株的交叉保护性试验第38-48页
 1 引言第38页
 2 材料和方法第38-41页
   ·材料第38-39页
     ·病毒株第38页
     ·SPF鸡和SPF鸡胚第38页
     ·各毒株HI抗原第38-39页
     ·主要试剂第39页
     ·主要仪器第39页
   ·方法第39-41页
     ·疫苗制备第39页
     ·组织石蜡切片和 HE 染色试验方法第39-40页
     ·试验设计与分组第40-41页
       ·分组第40页
       ·免疫第40页
       ·采血和HI抗体检测第40页
       ·交叉攻毒保护试验第40-41页
       ·结果评价第41页
 3 结果第41-46页
   ·HI 抗体测定结果第41-43页
   ·攻毒后试验动物排毒结果第43-44页
   ·攻毒后试验动物临床观察和组织病理学观察结果第44-46页
   ·交叉攻毒保护试验结果判定第46页
 4 讨论第46-48页
   ·本研究筛选的用于交叉攻毒保护试验的毒株第46-47页
   ·临床流行毒株之间的交叉攻毒保护性第47页
   ·H9 亚型禽流感病毒疫苗候选毒株的研究方法第47-48页
全文总结第48-50页
参考文献第50-58页
ABSTRACT第58-60页
附录 1 临床分离株 HA 基因氨基酸序列比对图谱第60-75页
附录 2 临床分离株 NA 基因氨基酸序列比对图谱第75-87页

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