| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一部分 前言 | 第9-20页 |
| 1. 钾作为营养元素的重要性 | 第9-12页 |
| ·钾作为营养元素可促进植物的生长 | 第9-12页 |
| ·植物细胞内耐盐性调节 | 第12页 |
| 2. 钾转运体蛋白家族 | 第12-17页 |
| 3. 两种质子泵 | 第17-19页 |
| 4. 论文的研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第20-39页 |
| 1. 材料 | 第20-21页 |
| ·实验材料及器材 | 第20页 |
| ·试剂药品及简略缩写 | 第20-21页 |
| 2. 拟南芥Atkea4突变体鉴定与表型观察 | 第21-24页 |
| ·拟南芥Atkea4突变体纯合体的鉴定 | 第21-23页 |
| ·拟南芥Atkea4突变体的表型观察 | 第23-24页 |
| 3. 液胞离子转运活力研究 | 第24-27页 |
| ·材料的培养 | 第24页 |
| ·提取及分析液胞的药品 | 第24页 |
| ·提取液胞 | 第24-25页 |
| ·液胞蛋白含量的测定 | 第25-26页 |
| ·液胞离子转运活力的测定 | 第26-27页 |
| 4. 拟南芥K~+/H~+反向转运体AtKEA4的亚细胞定位 | 第27-39页 |
| ·培养细菌培养基的配制 | 第27页 |
| ·构建稳定表达体植株 | 第27-35页 |
| ·pEGAD载体信息 | 第27-28页 |
| ·AtKEA4基因目的片段的获得 | 第28-30页 |
| ·AtKEA4基因目的片段与载体的连接 | 第30页 |
| ·重组质粒的转化 | 第30-31页 |
| ·验证转化菌的可信度 | 第31-32页 |
| ·将验证正确的质粒转化农杆菌 | 第32-34页 |
| ·农杆菌转染拟南芥花序 | 第34页 |
| ·AtKEA4基因过表达体的筛选 | 第34-35页 |
| ·构建瞬时表达的原生质体 | 第35-39页 |
| ·pSAT6-EYPF-KEA4载体的信息 | 第35页 |
| ·AtKEA4基因目的片段的获得 | 第35-36页 |
| ·AtKEA4基因目的片段与载体的连接 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的转化 | 第37页 |
| ·验证转化菌的可信度 | 第37-38页 |
| ·原生质体的获得及质粒转化 | 第38-39页 |
| 第三部分 实验结果与讨论 | 第39-56页 |
| 1. 实验结果 | 第39-53页 |
| ·拟南芥Atkea4突变体纯合体的鉴定 | 第39-40页 |
| ·拟南芥Atkea4突变体表型观察 | 第40-43页 |
| ·拟南芥Atkea4突变体植株正常条件下的生长情况 | 第40页 |
| ·NaCl处理 | 第40-41页 |
| ·KCl处理 | 第41-42页 |
| ·甘露醇处理 | 第42-43页 |
| ·拟南芥K~+/H~+反向转运体AtKEA4基因生物信息学分析 | 第43-45页 |
| ·AtKEA4基因分析 | 第43-44页 |
| ·拟南芥K~+/H~+反向转运体AtKEA4蛋白的二级结构 | 第44-45页 |
| ·推测蛋白质中氨基酸残基上的磷酸化位点 | 第45页 |
| ·液胞离子转运活力分析 | 第45-47页 |
| ·H~+-ATPase活力的测定及检验液胞纯度 | 第45-46页 |
| ·液胞离子转运体活力分析 | 第46-47页 |
| ·拟南芥AtKEA4的亚细胞定位 | 第47-50页 |
| ·AtKEA4基因的克隆 | 第47页 |
| ·菌落PCR验证 | 第47-48页 |
| ·提取质粒酶切验证及测序 | 第48-49页 |
| ·农杆菌菌落PCR筛选 | 第49页 |
| ·提取农杆菌质粒回转大肠杆菌进行酶切验证 | 第49页 |
| ·过表达体的筛选及纯合体植株的获得 | 第49-50页 |
| ·原生质体荧光观察 | 第50-51页 |
| ·高保真克隆AtKEA4基因 | 第50页 |
| ·菌落PCR验证 | 第50页 |
| ·提取质粒酶切验证及测序 | 第50-51页 |
| ·拟南芥AtKEA4过表达体共聚焦荧光显微观察 | 第51-53页 |
| 2. 讨论 | 第53-55页 |
| ·AtKEA4基因功能研究 | 第53-54页 |
| ·液胞离子转运活力分析 | 第54页 |
| ·AtKEA4可能定位在内质网上 | 第54-55页 |
| 3. 结论 | 第55-56页 |
| 第四部分 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
