| 附件 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 图目录 | 第12-13页 |
| 表目录 | 第13-14页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第章 引言 | 第15-25页 |
| ·MIRNA 的分离鉴别 | 第15-16页 |
| ·正向遗传学 | 第15页 |
| ·直接克隆 | 第15-16页 |
| ·生物信息学分析 | 第16页 |
| ·高通量测序技术 | 第16页 |
| ·MIRNA 和靶标基因 | 第16-20页 |
| ·保守和非保守性 miRNA | 第16-17页 |
| ·MiRNA 和其靶基因 | 第17页 |
| ·MiRNA 和靶基因间的互作方式 | 第17-18页 |
| ·番茄中已验证的 miRNA 的靶基因 | 第18-20页 |
| ·番茄中 MIRNA 的功能 | 第20-24页 |
| ·MiRNA 与生长发育 | 第20-22页 |
| ·MiRNA 与番茄植株的非生物逆境响应 | 第22-23页 |
| ·MiRNA 与番茄植株的生物逆境响应 | 第23-24页 |
| ·研究目的 | 第24-25页 |
| 第二章 与烟粉虱诱导相关的 MIRNA 的深度测序分析 | 第25-33页 |
| ·材料方法 | 第25-27页 |
| ·番茄材料 | 第25页 |
| ·烟粉虱侵染 | 第25-26页 |
| ·番茄叶片的总 RNA 提取 | 第26页 |
| ·番茄 sRNA 测序分析 | 第26页 |
| ·测序结果分析 | 第26-27页 |
| ·结果分析 | 第27-31页 |
| ·深度测序鉴定普通番茄和多毛番茄中的 miRNA | 第27页 |
| ·鉴定两个文库中的 miRNA | 第27-29页 |
| ·保守 miRNA 在普通番茄和多毛番茄中的表达差异 | 第29页 |
| ·深度测序鉴定烟粉虱侵染后表达量变化的 miRNA | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 MIRNA 真实性鉴定及接虫鉴定表达量变化 | 第33-45页 |
| ·Northem blotting 验证预测得到的 MIRNA | 第33-35页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·叶片总 RNA 提取 | 第33页 |
| ·探针的制备与标记 | 第33-34页 |
| ·Northern blotting | 第34-35页 |
| ·QRT-PCR 验证预测得到的 MIRNA | 第35-37页 |
| ·试验材料 | 第35-36页 |
| ·总 RNA 提取 | 第36页 |
| ·反转录 cDNA 第链 | 第36页 |
| ·QRT-PCR | 第36-37页 |
| ·接虫前后 MIRNA 表达量变化鉴定 | 第37页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·烟粉虱侵染 | 第37页 |
| ·叶片总 RNA 提取 | 第37页 |
| ·反转录 cDNA 第链 | 第37页 |
| ·QRT-PCR 鉴定表达量变化 | 第37页 |
| ·结果分析 | 第37-43页 |
| ·Northern blotting 验证预测的 miRNAs | 第37-38页 |
| ·QRT-PCR 验证预测的 miRNAs | 第38-41页 |
| ·QRT-PCR 鉴定接虫前后 miRNA 的表达量变化 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 表达载体构建及转基因功能鉴定 | 第45-63页 |
| ·MIRNA 前体序列克隆 | 第45-46页 |
| ·试验材料 | 第45页 |
| ·DNA 提取 | 第45页 |
| ·PCR 扩增 | 第45页 |
| ·胶回收 PCR 产物 | 第45-46页 |
| ·胶回收产物的连接、转化 | 第46页 |
| ·表达载体构建 | 第46-48页 |
| ·试验材料 | 第46页 |
| ·超量表达载体构建 | 第46-48页 |
| ·抑制表达载体构建 | 第48页 |
| ·将载体转入农杆菌 | 第48-49页 |
| ·试验材料 | 第48页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第48-49页 |
| ·冻融法转入农杆菌 | 第49页 |
| ·转基因植株番茄的获得 | 第49-50页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·播种 | 第49页 |
| ·预培养 | 第49页 |
| ·共培养 | 第49-50页 |
| ·诱导分化培养 | 第50页 |
| ·生根培养 | 第50页 |
| ·炼苗移栽 | 第50页 |
| ·靶标基因鉴定 | 第50-53页 |
| ·试验材料 | 第50页 |
| ·总 RNA 提取 | 第50页 |
| ·加 RNA Oligo | 第50-51页 |
| ·RNA 连接产物的纯化 | 第51页 |
| ·反转录 | 第51-52页 |
| ·cDNA 末端快速扩增 | 第52-53页 |
| ·PCR 产物测序 | 第53页 |
| ·鉴定接虫前后靶标基因的表达量变化 | 第53-54页 |
| ·试验材料 | 第53页 |
| ·反转录 | 第53页 |
| ·QRT-PCR | 第53-54页 |
| ·结果分析 | 第54-61页 |
| ·MiRNAs 前体序列克隆 | 第54-55页 |
| ·表达载体构建 | 第55-56页 |
| ·番茄转化再生培养 | 第56-57页 |
| ·转基因番茄阳性植株鉴定 | 第57-59页 |
| ·靶标基因预测 | 第59-60页 |
| ·靶标基因鉴定 | 第60页 |
| ·接虫前后靶标基因的表达量变化鉴定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简历 | 第85页 |
