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骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎软骨细胞凋亡和胞外基质降解的影响

中文摘要第1-15页
ABSTRACT第15-27页
英文缩略词表第27-30页
前言第30-39页
 参考文献第35-39页
实验一 骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎动物模型的作用研究第39-67页
 1 材料第39-41页
   ·实验动物第39页
   ·药品和试剂第39-40页
   ·主要仪器第40-41页
 2 方法第41-51页
   ·实验分组第41页
   ·动物模型的建立第41页
   ·给药方法第41-42页
   ·药效学实验方法第42页
   ·样品制备第42页
   ·指标观察及检测第42-50页
   ·统计学处理第50-51页
 3 结果第51-62页
   ·X 影像学检查造模前后及治疗对 OA 模型关节的改变第51页
   ·大体观察第51-52页
   ·组织病理观察 (OARSI 评定法)第52-53页
   ·大鼠体重和关节变化第53-55页
   ·CSC 大鼠药效作用评价第55-56页
   ·TUNEL 法检测软骨及滑膜细胞凋亡第56-59页
   ·ELISA 检测血清 TNF-a、IL-1β、HA、IgM 含量第59-62页
 4 讨论第62-64页
   ·OA 动物模型的分类第62页
   ·冷固法制作 OA 动物模型的背景及选择第62页
   ·结果分析第62-64页
 5 结论第64页
 参考文献第64-67页
实验二 骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎氧化损伤的保护作用第67-89页
 1 材料第67-69页
 2 方法第69-74页
 3 结果第74-84页
   ·SOD、MDA、LPO 含量检测第74-76页
   ·软骨 HIF-1a、HIF-2a、VEGF 阳性细胞率第76-80页
   ·HIF-1a、HIF-2a、VEGFmRNA 扩增产物电泳鉴定第80页
   ·HIF-1a、HIF-2a、VEGFmRNA 的表达第80-84页
 4 讨论第84-85页
   ·氧化损伤在 OA 中的作用第84页
   ·骨灵膏对 OA 中氧化损伤的保护作用第84页
   ·低氧诱导因子(HIF)在 OA 的作用第84-85页
   ·骨灵膏对 OA 中 HIF 的影响第85页
 5 结论第85-86页
 参考文献第86-89页
实验三 骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎炎症损伤的作用第89-115页
 1 材料第89-91页
 2 方法第91-98页
 3 结果第98-108页
   ·血清与滑膜的 IL-1β、TNF-a、PGE2、COX-2、IFN-γ的含量第98-103页
   ·软骨 IL-17、IL-18 的阳性率第103-105页
   ·各组血清 IL-17、IL-18 的含量第105-106页
   ·Western Blotting 测定关节软骨 ADAMTs-4、5 蛋白的表达第106-108页
 4 讨论第108-111页
   ·ADAMTS 与 OA 的关系第108页
   ·IL-1β、TNF-a 与 OA 的关系第108-109页
   ·PGE2、COX-2 与 OA 的关系第109页
   ·IFN-γ与 OA 的关系第109页
   ·IL-18、IL-17 与 OA第109-110页
   ·骨灵膏及其拆方制剂、塞来昔布对 OA 的保护作用机制第110-111页
 5 结论第111页
 参考文献第111-115页
实验四 骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎免疫功能的作用第115-134页
 1 材料第115-117页
 2 方法第117-119页
 3 结果第119-130页
   ·免疫荧光检测血浆 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的阳性率第119-122页
   ·免疫荧光检测滑膜 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的阳性率第122-125页
   ·流式细胞仪检测软骨 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的阳性率第125-127页
   ·流式细胞仪检测软骨 CD80、CD86、COL-Ⅱ的阳性率第127-130页
 4 讨论第130-132页
   ·T 淋巴细胞介导的适应性细胞免疫应答在 OA 中的作用第130-131页
   ·软骨细胞的抗原呈递细胞 APC 属性第131-132页
   ·骨灵膏及其拆方制剂、CLXB 对 OA 适应性免疫功能的作用机制第132页
 5 结论第132页
 参考文献第132-134页
实验五 骨灵膏及其拆方制剂对 OA 软骨细胞活力的影响第134-150页
 1 材料第134-136页
 2 方法第136-140页
 3 结果第140-146页
   ·各组大鼠在体软骨细胞计数第140-141页
   ·各组体外培养软骨细胞形态观察第141-142页
   ·培养软骨细胞Ⅱ型胶原的表达及鉴定第142-143页
   ·CCK8 检测软骨细胞增殖第143-145页
   ·各组脾脏指数、胸腺指数的测定第145-146页
 4 讨论第146-147页
   ·软骨细胞的功能与 OA第146页
   ·脾脏和胸腺与软骨组织关系第146-147页
   ·骨灵膏及其拆方制剂、CLXB 对 OA 软骨细胞作用机制第147页
 5 结论第147页
 参考文献第147-150页
实验六 骨灵膏及其拆方制剂对 OA 软骨细胞凋亡和胞外基质降解的影响第150-191页
 1 材料第151-153页
 2 方法第153-160页
 3 结果第160-178页
   ·组织病理观察 Mankin 评分法第160-162页
   ·组织病理观察 OARSI 评定法第162页
   ·免疫组化检测软骨组织 Wnt-2、β-catenin 的含量第162-164页
   ·软骨Ⅱ型胶原的阳性表达第164-166页
   ·各组血清 NO、IL-10 的含量第166-167页
   ·Western Blotting 测定关节软骨 LRP-5 蛋白的表达第167-168页
   ·Western Blotting 测定关节软骨 GADD153 蛋白的表达第168-169页
   ·FQ-RT-PCR 测定 BMP-2、MMP-13、Caspase-9、Caspase-3mRNA 的表达第169-173页
   ·FQ-RT-PCR 测定 Bcl-2、Bax、MMP-3、TIMP-1mRNA 的表达第173-178页
 4 讨论第178-184页
   ·ERS 凋亡途径在 OA 中细胞凋亡的作用机制第178页
   ·MMPs 和其抑制剂在 OA 中软骨基质降解的作用机制第178-179页
   ·Wnt/β-catenin 信号通路在 OA 中的作用机制第179-180页
   ·Ⅱ型胶原在 OA 中的作用机制第180-181页
   ·骨灵膏及其拆方制剂对 OA 的临床研究第181页
   ·骨灵膏及其拆方制剂、CLXB 对 OA 的实验研究第181-184页
 5 结论第184-185页
   ·骨灵膏对骨关节炎 ERS 途径的作用第184页
   ·骨灵膏对骨关节炎 Wnt/β-catenin 信号通路的作用第184页
   ·骨灵膏对骨关节炎软骨细胞外基质Ⅱ型胶原的作用第184-185页
 参考文献第185-191页
结语第191-193页
附录第193-229页
 综述 骨关节炎细胞凋亡与胞外基质降解的分子机制及中医药研进展第193-229页
  参考文献第212-229页
个人简介第229-231页
致谢第231页

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