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miRNA-146a和EPHX2基因多态性与长沙地区汉族人群缺血性脑卒中遗传易感性的关联研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-17页
缩略词第17-18页
第一章 前言第18-22页
第二章 材料与方法第22-36页
   ·试剂和仪器第22-24页
     ·主要试剂和药品第22-23页
     ·主要溶液的配制第23页
     ·主要仪器第23-24页
   ·样本、临床资料的收集和处理第24-25页
   ·外周血基因组DNA的提取第25页
   ·EPHX2 rs1042032基因分型第25-26页
     ·引物设计第25页
     ·PCR扩增第25-26页
     ·PCR产物酶切分型第26页
   ·miR-146a rs2910164基因分型第26-27页
     ·引物设计第26页
     ·PCR扩增第26-27页
     ·PCR产物酶切分型第27页
   ·琼脂糖凝胶电泳第27页
   ·人外周血单个核细胞(PBMC)的提取第27-28页
   ·mRNA提取和实时定量PCR(real-time PCR)第28-29页
     ·mRNA的提取第28页
     ·逆转录合成cDNA第28-29页
     ·Real-time PCR第29页
   ·报告基因质粒构建第29-33页
     ·目的片段PCR扩增第29-30页
     ·PCR产物的回收第30-31页
     ·连接T克隆载体第31页
     ·转化第31页
     ·提取质粒DNA第31-32页
     ·报告基因质粒的连接第32-33页
     ·报告基因质粒的鉴定第33页
   ·细胞瞬时转染第33-34页
   ·报告基因荧光素酶活性的检测第34页
     ·转染后细胞的裂解第34页
     ·检测荧光第34页
   ·miR-146a对HUVEC中EPHX2表达的影响第34-35页
     ·miR-146a模拟物处理内皮细胞第34-35页
     ·miR-146a以及EPHX2 mRNA表达测定第35页
   ·统计分析第35-36页
第三章 结果第36-51页
   ·miRNA-146a和EPHX2基因多态性与缺血性脑卒中遗传易感性的关联关系分析第36-40页
     ·病例组与对照组人群一般情况比较第36-37页
     ·EPHX2 rs1042032多态性基因分型第37页
     ·miR-146a rs2910164(G/C)多态性分基因分型第37页
     ·EPHX2 rs1042032多态性与缺血性脑卒中遗传易感性的关联关系分析第37-39页
     ·miR-146a rs2910164多态性与缺血性脑卒中遗传易感性的关联关系分析第39-40页
   ·miR-146a与EPHX2基因遗传多态性相互作用对缺血性脑卒中遗传易感性的影响第40-41页
   ·EPHX2 rs1042032和miR-146a rs2910164多态性对缺血性脑卒中患者PBMC中EPHX2 mRNA及miR-146a表达水平的影响第41-42页
     ·rs1042032多态性对IS患者PBMC中EPHX2 mRNA表达水平的影响第41页
     ·miR-146a rs2910164多态性对IS患者PBMC中miR-146a表达水平的影响第41-42页
     ·IS患者PBMC中miR-146a与EPHX2 mRNA表达水平的相关性分析第42页
     ·EPHX2 rs1042032和miR-146a rs2910164多态联合基因型对IS患者PBMC中EPHX2 mRNA和miR-146a表达水平的影响第42页
   ·报告基因实验确定EPHX2 rs1042032和rs1042064多态性的功能第42-43页
     ·报告基因质粒的构建、定点突变和鉴定第42-43页
     ·pGL3-EPHX2 rs1042032-A质粒和pGL3一EPHX2 rs1042032-G质粒报告基因活性的测定第43页
     ·miR-146a对PGL3-EPHX2质粒报告基因活性的影响第43页
   ·miR-146a模拟物对HUVEC中miR-146a和EPHX2 mRNA表达的影响第43-44页
 附图第44-51页
第四章 讨论第51-56页
第五章 结论第56-57页
参考文献第57-63页
综述第63-83页
 参考文献第75-83页
致谢第83-84页
攻读学位期间主要的研究成果第84页

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