中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-17页 |
缩略词 | 第17-18页 |
第一章 前言 | 第18-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-36页 |
·试剂和仪器 | 第22-24页 |
·主要试剂和药品 | 第22-23页 |
·主要溶液的配制 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·样本、临床资料的收集和处理 | 第24-25页 |
·外周血基因组DNA的提取 | 第25页 |
·EPHX2 rs1042032基因分型 | 第25-26页 |
·引物设计 | 第25页 |
·PCR扩增 | 第25-26页 |
·PCR产物酶切分型 | 第26页 |
·miR-146a rs2910164基因分型 | 第26-27页 |
·引物设计 | 第26页 |
·PCR扩增 | 第26-27页 |
·PCR产物酶切分型 | 第27页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
·人外周血单个核细胞(PBMC)的提取 | 第27-28页 |
·mRNA提取和实时定量PCR(real-time PCR) | 第28-29页 |
·mRNA的提取 | 第28页 |
·逆转录合成cDNA | 第28-29页 |
·Real-time PCR | 第29页 |
·报告基因质粒构建 | 第29-33页 |
·目的片段PCR扩增 | 第29-30页 |
·PCR产物的回收 | 第30-31页 |
·连接T克隆载体 | 第31页 |
·转化 | 第31页 |
·提取质粒DNA | 第31-32页 |
·报告基因质粒的连接 | 第32-33页 |
·报告基因质粒的鉴定 | 第33页 |
·细胞瞬时转染 | 第33-34页 |
·报告基因荧光素酶活性的检测 | 第34页 |
·转染后细胞的裂解 | 第34页 |
·检测荧光 | 第34页 |
·miR-146a对HUVEC中EPHX2表达的影响 | 第34-35页 |
·miR-146a模拟物处理内皮细胞 | 第34-35页 |
·miR-146a以及EPHX2 mRNA表达测定 | 第35页 |
·统计分析 | 第35-36页 |
第三章 结果 | 第36-51页 |
·miRNA-146a和EPHX2基因多态性与缺血性脑卒中遗传易感性的关联关系分析 | 第36-40页 |
·病例组与对照组人群一般情况比较 | 第36-37页 |
·EPHX2 rs1042032多态性基因分型 | 第37页 |
·miR-146a rs2910164(G/C)多态性分基因分型 | 第37页 |
·EPHX2 rs1042032多态性与缺血性脑卒中遗传易感性的关联关系分析 | 第37-39页 |
·miR-146a rs2910164多态性与缺血性脑卒中遗传易感性的关联关系分析 | 第39-40页 |
·miR-146a与EPHX2基因遗传多态性相互作用对缺血性脑卒中遗传易感性的影响 | 第40-41页 |
·EPHX2 rs1042032和miR-146a rs2910164多态性对缺血性脑卒中患者PBMC中EPHX2 mRNA及miR-146a表达水平的影响 | 第41-42页 |
·rs1042032多态性对IS患者PBMC中EPHX2 mRNA表达水平的影响 | 第41页 |
·miR-146a rs2910164多态性对IS患者PBMC中miR-146a表达水平的影响 | 第41-42页 |
·IS患者PBMC中miR-146a与EPHX2 mRNA表达水平的相关性分析 | 第42页 |
·EPHX2 rs1042032和miR-146a rs2910164多态联合基因型对IS患者PBMC中EPHX2 mRNA和miR-146a表达水平的影响 | 第42页 |
·报告基因实验确定EPHX2 rs1042032和rs1042064多态性的功能 | 第42-43页 |
·报告基因质粒的构建、定点突变和鉴定 | 第42-43页 |
·pGL3-EPHX2 rs1042032-A质粒和pGL3一EPHX2 rs1042032-G质粒报告基因活性的测定 | 第43页 |
·miR-146a对PGL3-EPHX2质粒报告基因活性的影响 | 第43页 |
·miR-146a模拟物对HUVEC中miR-146a和EPHX2 mRNA表达的影响 | 第43-44页 |
附图 | 第44-51页 |
第四章 讨论 | 第51-56页 |
第五章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
综述 | 第63-83页 |
参考文献 | 第75-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第84页 |