| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-26页 |
| ·蛋白质 marker 成分 | 第10页 |
| ·蛋白质纯化的一般程序 | 第10-15页 |
| ·样品前处理 | 第10-11页 |
| ·粗分级分离纯化 | 第11-12页 |
| ·细分级分离纯化 | 第12-15页 |
| ·蛋白质方法的优缺点比较 | 第15-16页 |
| ·类弹性蛋白多肽 | 第16-25页 |
| ·类弹性蛋白多肽简介 | 第16-17页 |
| ·类弹性蛋白多肽的合成方法 | 第17-23页 |
| ·类弹性蛋白多肽纯化方面的研究 | 第23-25页 |
| ·课题目的与意义 | 第25页 |
| ·课题创新点 | 第25-26页 |
| 第2章 不同长度的 pUC19-ELP[KV_8F]载体的构建 | 第26-42页 |
| ·ELPs 的命名 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-31页 |
| ·实验方法 | 第31-39页 |
| ·RDL 法延长 ELPs 过程 | 第31-32页 |
| ·菌种活化 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33-34页 |
| ·克隆载体 pUC19-ELP[KV8F-60]的构建 | 第34-35页 |
| ·目的基因片段的电泳回收 | 第35页 |
| ·单酶切载体去磷酸化 | 第35-37页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第37页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第38-39页 |
| ·不同长度的克隆载体 pUC19-ELP[KV8F-X]的构建 | 第39页 |
| ·实验结果与分析 | 第39-42页 |
| 第3章 表达载体 pET-22b-ELP[KV8F-X]的构建 | 第42-48页 |
| ·表达载体及宿主的选择 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·菌种与质粒 | 第42-43页 |
| ·酶与生物试剂 | 第43页 |
| ·仪器与设备 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·缓冲液与试剂 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·RDL 法构建表达载体过程 | 第43-44页 |
| ·菌种活化 | 第44页 |
| ·质粒提取 | 第44页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
| ·表达载体构建 | 第44-45页 |
| ·感受态细胞制备 | 第45-46页 |
| ·重组质粒的转化 | 第46页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第46页 |
| ·实验结果与分析 | 第46-48页 |
| 第4章 类弹性蛋白多肽 ELP[KV8F-X]的表达与纯化 37 4.1 实验材料 | 第48-56页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·菌种与质粒 | 第48页 |
| ·生物试剂 | 第48页 |
| ·培养基 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·试剂的配制 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·类弹性蛋白多肽的诱导表达 | 第49页 |
| ·类弹性蛋白多肽的纯化 | 第49-50页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第50-51页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第51-52页 |
| ·实验结果与分析 | 第52-56页 |
| 第5章 类弹性蛋白多肽 marker 的成本估算 47 5.1 药品成本 | 第56-62页 |
| ·药品成本 | 第56-58页 |
| ·蛋白质 marker 保存缓冲液成本计算 | 第58-59页 |
| ·类弹性蛋白 marker 的市场优势 | 第59-62页 |
| 第6章 小结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 附录 | 第74-80页 |
| 在学期间的研究成果及发表的学术论文 | 第80页 |
