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猪场废弃物堆肥中芽孢杆菌属和梭菌属细菌的分子生态学研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
缩略语表第15-16页
第一章 文献综述第16-35页
 1 畜禽养殖场废弃物污染现状第16-17页
 2 我国畜禽粪便资源化利用状况第17-18页
   ·制作有机肥料第17页
   ·用作能源第17页
   ·用作饲料第17-18页
 3 畜禽粪便好氧堆肥技术第18-23页
   ·堆肥的概念第18页
   ·好氧堆肥的机理和过程第18-19页
   ·堆肥技术的类别及其特点第19-20页
   ·堆肥化过程中的影响因素第20-23页
 4 堆肥微生物群落结构研究分析的分子生态学方法第23-30页
   ·基于16S rRNA/rDNA序列分析技术在环境微生物研究中的应用现状第23-29页
   ·堆肥微生物学的其他研究方法第29-30页
 5 芽孢杆菌属(Bacillus)的研究进展第30-33页
   ·芽孢杆菌属的分类地位第30-32页
   ·芽孢杆菌的主要特性第32页
   ·芽孢杆菌的应用第32-33页
 6 梭菌属(Clostridium)的研究进展第33-34页
   ·梭菌的主要特性第33页
   ·梭菌属的应用第33-34页
 7 本研究的目的和意义第34-35页
第二章 材料和方法第35-60页
 1 试验材料第35-39页
   ·堆肥材料第35页
   ·用于DGGE分析和荧光定量分析的基因组DNA样品第35页
   ·主要仪器设备第35-36页
   ·主要试剂、药品及试剂盒第36页
   ·主要化学试剂及其配制第36-39页
 2 试验方法第39-60页
   ·堆肥试验第39页
   ·堆肥方法第39-40页
   ·堆肥样品的采集与保存第40页
   ·堆肥样品各指标的分析方法第40-44页
   ·堆肥样品基因组DNA的提取、纯化第44-46页
   ·PCR反应第46-48页
   ·变性梯度凝胶电泳第48-52页
   ·芽孢杆菌的分离、鉴定第52-55页
   ·荧光原位杂交(FISH)第55-60页
第三章 结果与分析第60-83页
 1 堆肥试验结果和堆肥化过程中的参数变化第60-61页
   ·堆体的物理性状第60页
   ·堆体的温度变化第60-61页
   ·无害化卫生学第61页
   ·发芽指数第61页
 2 堆肥样品微生物总DNA的提取和质量检测第61-62页
 3 巢式PCR反应第62-64页
   ·细菌近全长16S rDNA片断的扩增第62-63页
   ·芽孢杆菌属的16S rDNA特异性扩增第63-64页
   ·梭菌属的16S rDNA特异性扩增第64页
 4 DGGE图谱及系统进化分析第64-72页
   ·芽孢杆菌属细菌的DGGE分析第64-67页
   ·芽孢杆菌属细菌的系统进化分析第67-68页
   ·梭菌属细菌的DGGE分析第68-71页
   ·梭菌属细菌的系统进化分析第71-72页
 5 芽孢杆菌的分离与鉴定第72-79页
   ·芽孢杆菌的分离第72页
   ·芽孢杆菌的鉴定第72-79页
 6 堆肥样品荧光原位杂交第79-83页
   ·芽孢杆菌和梭菌杂交条件的优化第79-81页
   ·探针的特异性分析第81页
   ·堆肥样品中芽孢杆菌和梭菌的时空分布特征第81-83页
第四章 讨论第83-93页
 1 堆肥样品中微生物基因组DNA的提取第83-84页
 2 巢式PCR的应用第84页
 3 FISH分析第84-87页
   ·堆肥样品中微生物的收集第84-85页
   ·微生物的固定及预处理第85-86页
   ·FISH技术的缺陷第86-87页
 4 传统方法和现代分子生物学方法的结合应用第87-89页
   ·可培养的芽孢杆菌的鉴定第87-88页
   ·芽孢杆菌属和梭菌的多样性研究第88-89页
 5 猪粪堆肥中芽孢杆菌和梭菌的种群结构及动态变化第89-93页
   ·传统分离培养分析第89-90页
   ·PCR-DGGE分析第90-91页
   ·荧光原位杂交分析第91-93页
第五章 小结第93-96页
本研究的创新点第96页
进一步研究内容第96-97页
参考文献第97-107页
致谢第107-108页
在读期间发表论文题录第108-109页
附录第109-116页

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