| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 文献综述 | 第14-38页 |
| 1 猪瘟病毒分子生物学特征 | 第14-17页 |
| ·病原学特征 | 第14-15页 |
| ·流行病学特征 | 第15-16页 |
| ·临床症状和病理变化特征 | 第16-17页 |
| 2 猪瘟病毒基因组的结构特征 | 第17-22页 |
| ·5'UTR | 第18页 |
| ·结构蛋白 | 第18-20页 |
| ·非结构蛋白 | 第20-22页 |
| 3 猪瘟病毒的基因分类和分型 | 第22-24页 |
| ·猪瘟病毒全基因组序列研究进展 | 第22-23页 |
| ·猪瘟病毒的基因分型 | 第23页 |
| ·我国CSFV基因型状况 | 第23-24页 |
| 4 猪瘟病毒的毒力和致病机理 | 第24-25页 |
| 5 猪瘟病毒的诊断方法 | 第25-28页 |
| ·临床诊断 | 第25页 |
| ·病原学诊断 | 第25页 |
| ·血清学检测 | 第25-26页 |
| ·分子生物学检测技术 | 第26-28页 |
| 6 猪瘟病毒疫苗的研究进展 | 第28-32页 |
| ·灭活疫苗 | 第28-29页 |
| ·弱毒疫苗 | 第29页 |
| ·基因工程疫苗 | 第29-32页 |
| 参考文献 | 第32-38页 |
| 实验部分 | 第38-94页 |
| 第一章 猪源MX1基因的原核表达、鉴定及抗血清制备 | 第38-52页 |
| 摘要 | 第38页 |
| Abstract | 第38-40页 |
| 1 实验材料 | 第40-41页 |
| ·菌种和质粒 | 第40页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40-41页 |
| 2. 实验方法 | 第41-44页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·猪源Mx1蛋白ORF的获得 | 第41-42页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第42页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第43页 |
| ·融合蛋白的Western blot鉴定 | 第43页 |
| ·目的蛋白切胶免疫小鼠制备多克隆抗体 | 第43页 |
| ·Western blot鉴定血清抗Mx1蛋白效果 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-48页 |
| ·PCR扩增产物 | 第44页 |
| ·poMx1基因的亚克隆鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组原核表达质粒鉴定 | 第45页 |
| ·重组质粒pGEX-poMx1的表达及条件优化 | 第45-47页 |
| ·融合蛋白的Western blot结果 | 第47-48页 |
| ·抗血清的特异性检测 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 第二章 猪源MX1蛋白的原核表达、纯化及抗病毒活性初步研究 | 第52-74页 |
| 摘要 | 第52页 |
| Abstract | 第52-54页 |
| 1 实验材料 | 第54-56页 |
| ·菌种和质粒 | 第54-55页 |
| ·毒株和细胞 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·主要仪器设备 | 第55-56页 |
| 2 实验方法 | 第56-62页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·猪源Mx1基因与蛋白转导域PTD基因的串联和扩增 | 第56-57页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第57页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第57页 |
| ·融合蛋白的纯化与鉴定 | 第57-58页 |
| ·融合蛋白的复性 | 第58页 |
| ·PTD介导的融合蛋白转导试验 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白抗VSV活性检测 | 第59-61页 |
| ·融合蛋白抗猪瘟病毒活性检测 | 第61-62页 |
| 3 结果 | 第62-69页 |
| ·猪源Mxl基因与蛋白转导域PTD基因的串联和扩增 | 第62-63页 |
| ·重组原核表达质粒鉴定 | 第63-64页 |
| ·重组质粒pCold-PTD-poMx1的表达 | 第64页 |
| ·融合蛋白的纯化和鉴定 | 第64-65页 |
| ·融合蛋白入胞鉴定结果 | 第65-66页 |
| ·融合蛋白对VSV复制的抑制作用 | 第66-68页 |
| ·融合蛋白对猪瘟病毒复制的抑制作用 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第三章 稳定表达猪源MX1蛋白PK-15细胞系的建立及其抗猪瘟病毒的初步研究 | 第74-94页 |
| 摘要 | 第74页 |
| Abstract | 第74-76页 |
| 1 实验材料 | 第76-77页 |
| ·菌种和质粒 | 第76页 |
| ·毒株和细胞 | 第76页 |
| ·主要试剂 | 第76页 |
| ·主要仪器设备 | 第76-77页 |
| 2 实验方法 | 第77-81页 |
| ·引物的设计与合成 | 第77-78页 |
| ·猪源Mx1蛋白ORF的获取 | 第78页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第78-79页 |
| ·细胞系的筛选 | 第79页 |
| ·稳定表达融合蛋白的细胞系的鉴定 | 第79-80页 |
| ·PK-15/EGFP-poMx1细胞系对猪瘟病毒的抑制作用 | 第80-81页 |
| ·EGFP-poMx1在细胞系中与猪瘟病毒的荧光共定位 | 第81页 |
| 3 结果 | 第81-89页 |
| ·猪源Mx1蛋白ORF的扩增 | 第81-82页 |
| ·重组真核表达质粒鉴定 | 第82-83页 |
| ·细胞克隆筛选及鉴定 | 第83-84页 |
| ·PK-15/EGFP-poMx1细胞系对猪瘟病毒的抑制作用 | 第84-87页 |
| ·EGFP-poMx1在细胞系中与猪瘟病毒E2蛋白的荧光共定位 | 第87-89页 |
| 4 讨论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-94页 |
| 全文总结 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
