| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-23页 |
| ·端粒的研究背景 | 第9-17页 |
| ·端粒的结构与功能 | 第9-12页 |
| ·端粒结合蛋白和相关蛋白 | 第12-17页 |
| ·泛素化途径参与端粒调节 | 第17-20页 |
| ·泛素化修饰 | 第17页 |
| ·经典泛素化过程 | 第17-18页 |
| ·脱泛素化途径 | 第18-19页 |
| ·端粒结合蛋白的泛素化调节 | 第19-20页 |
| ·端粒相关蛋白 OTUB1 的研究背景 | 第20-22页 |
| ·本课题研究的目的、内容与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-56页 |
| ·实验材料 | 第23-30页 |
| ·细胞系、菌种及质粒载体 | 第23-25页 |
| ·细胞系 | 第23页 |
| ·菌种 | 第23页 |
| ·质粒及其物理图谱 | 第23-25页 |
| ·主要试剂及使用 | 第25-26页 |
| ·主要溶液及配制 | 第26-30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·常规实验方法 | 第31-42页 |
| ·分子克隆 | 第31-41页 |
| ·细胞培养 | 第41-42页 |
| ·功能性实验方法 | 第42-55页 |
| ·构建外源过表达 OTUB1 及突变体的稳定表达细胞系 | 第42-43页 |
| ·靶向 OTUB1 基因沉默 | 第43-47页 |
| ·蛋白实验 | 第47-49页 |
| ·双分子荧光互补 BiFC 实验 | 第49-50页 |
| ·GST Pull-down 实验 | 第50-51页 |
| ·免疫荧光 | 第51页 |
| ·端粒限制性片段测定（TRF，Telomere Restriction Fragment assay） | 第51-55页 |
| ·细胞核质组分分离实验 | 第55页 |
| ·生物信息学常用分析软件及网站 | 第55-56页 |
| 第三章 结果与分析 | 第56-68页 |
| ·OTUB1 及其突变体表达载体及稳定过表达细胞系的构建 | 第56-57页 |
| ·免疫荧光结果表明 OTUB1 在端粒上有一定比例的共定位 | 第57-58页 |
| ·双分子荧光互补实验 BiFC 筛选与 OTUB1 相关的端粒蛋白 | 第58-60页 |
| ·GST Pull-down 进一步验证 BiFC 结果 | 第60-62页 |
| ·OTUB1 基因沉默引发端粒功能失调（TIF，telomere dys-function induced foci） | 第62-64页 |
| ·端粒限制性片段长度实验表明 OTUB1 参与端粒长度调节 | 第64-66页 |
| ·OTUB1 对 TPP1 存在蛋白水平调节作用的探索 | 第66-68页 |
| 第四章 讨论 | 第68-70页 |
| 第五章 总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
