四种有机磷农药核酸适体的筛选、鉴定及其活性研究
| 目录 | 第1-14页 |
| 摘要 | 第14-17页 |
| ABSTRACT | 第17-21页 |
| 缩略词 | 第21-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-40页 |
| 1 核酸适体概述 | 第22-24页 |
| ·核酸适体简介 | 第22页 |
| ·核酸适体的特点和优势 | 第22-23页 |
| ·核酸适体与靶分子识别的基础 | 第23-24页 |
| 2 SELEX技术的研究进展 | 第24-29页 |
| ·SELEX技术的基本原理及流程 | 第24-26页 |
| ·SELEX技术的发展 | 第26-29页 |
| 3 小分子化合物核酸适体的研究进展 | 第29-31页 |
| ·识别小分子的核酸适体 | 第29-30页 |
| ·小分子化合物核酸适体筛选的瓶颈 | 第30-31页 |
| 4 荧光信号适体的设计策略 | 第31-34页 |
| ·单标记型荧光信号适体 | 第31页 |
| ·双标记型荧光信号适体 | 第31-34页 |
| 5 核酸适体在食品安全领域的应用 | 第34-37页 |
| ·在抗生素分析中的应用 | 第34-35页 |
| ·在金属离子分析中的应用 | 第35-36页 |
| ·在生物毒素分析中的应用 | 第36页 |
| ·在食源性致病菌分析中的应用 | 第36页 |
| ·在工业染料分析中的应用 | 第36-37页 |
| ·在转基因蛋白分析中的应用 | 第37页 |
| 6 四种有机磷农药简介 | 第37-38页 |
| 7 立题背景及主要研究内容 | 第38-40页 |
| ·立题背景 | 第38页 |
| ·主要研究内容 | 第38-40页 |
| 第二章 适体SELEX筛选中单链DNA的制备 | 第40-48页 |
| 0 前言 | 第40-41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| ·DNA序列 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41-42页 |
| ·dsDNA的制备 | 第42页 |
| ·ssDNA制备条件的优化 | 第42-43页 |
| ·统计分析方法 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-46页 |
| ·PCR扩增产物的鉴定 | 第43页 |
| ·时间对dsDNA与链霉亲和素标记凝胶结合的影响 | 第43-44页 |
| ·NaOH对生物素和链霉亲和素标记凝胶结合的影响 | 第44-45页 |
| ·dsDNA的碱变性拆分产物的鉴定 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 四种有机磷农药DNA适体的筛选 | 第48-64页 |
| 0 前言 | 第48-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-53页 |
| ·DNA序列 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51页 |
| ·SELEX筛选过程 | 第51-53页 |
| ·TA克隆与测序 | 第53页 |
| ·序列分析及二级结构预测 | 第53页 |
| ·统计分析方法 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-61页 |
| ·随机适体库的固定效果 | 第53-55页 |
| ·PCR条件的优化 | 第55-56页 |
| ·dsDNA拆分产物的鉴定 | 第56-57页 |
| ·每轮适体筛选的效率 | 第57页 |
| ·TA克隆与测序的结果 | 第57-59页 |
| ·序列的一级结构分析 | 第59页 |
| ·序列的二级结构预测 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第四章 适体活性鉴定方法的建立 | 第64-80页 |
| 0 前言 | 第64-65页 |
| 1 材料与方法 | 第65-70页 |
| ·DNA序列 | 第65-66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·主要仪器设备 | 第66页 |
| ·基于结构转换信号的适体活性鉴定方法 | 第66-67页 |
| ·基于分子信标的适体活性鉴定方法 | 第67-69页 |
| ·两种荧光鉴定方法的检测效果 | 第69-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-77页 |
| ·基于结构转换信号的适体活性鉴定方法的建立 | 第70-72页 |
| ·基于分子信标的适体活性鉴定方法的建立 | 第72-76页 |
| ·两种鉴定方法的检测效果 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| 4 本章小结 | 第78-80页 |
| 第五章 适体的活性、特异性鉴定 | 第80-92页 |
| 0 前言 | 第80页 |
| 1 材料与方法 | 第80-83页 |
| ·DNA序列 | 第80-81页 |
| ·试剂 | 第81页 |
| ·主要仪器设备 | 第81页 |
| ·适体活性鉴定的方法 | 第81-82页 |
| ·适体特异性分析的方法 | 第82页 |
| ·平衡解离常数(Kd)的测定 | 第82-83页 |
| ·统计分析方法 | 第83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-89页 |
| ·适体的活性鉴定结果 | 第83页 |
| ·适体的特异性分析结果 | 第83-86页 |
| ·平衡解离常数的测定结果 | 第86-89页 |
| 3 讨论 | 第89-90页 |
| 4 本章小结 | 第90-92页 |
| 第六章 适体活性位点的研究与分析 | 第92-110页 |
| 0 前言 | 第92-93页 |
| 1 材料与方法 | 第93-95页 |
| ·DNA序列 | 第93-94页 |
| ·试剂 | 第94页 |
| ·主要仪器设备 | 第94-95页 |
| ·竞争抑制法鉴定适体的活性 | 第95页 |
| ·紫外吸收光谱的测定方法 | 第95页 |
| ·统计分析方法 | 第95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-107页 |
| ·基于结构改造的适体活性位点研究 | 第95-101页 |
| ·基于碱基偏好的适体活性位点研究 | 第101-107页 |
| 3 讨论 | 第107-109页 |
| 4 本章小结 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-120页 |
| 全文结论 | 第120-122页 |
| 论文创新说明 | 第122-124页 |
| 研究展望 | 第124-126页 |
| 致谢 | 第126-128页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第128页 |
