| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩写表 | 第7-8页 |
| 技术路线 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 实验材料 | 第14-19页 |
| ·临床标本 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·菌种、质粒、细胞株 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·试剂配制方法 | 第16-19页 |
| ·免疫组织化学试剂配制 | 第16-17页 |
| ·质粒构建试剂的配制 | 第17页 |
| ·细胞培养试剂配制 | 第17-19页 |
| 第二章 实验方法 | 第19-28页 |
| ·Pokemon在肾癌组织中的表达 | 第19-21页 |
| ·制备蜡块 | 第19页 |
| ·切片 | 第19页 |
| ·HE染色 | 第19-20页 |
| ·S-P免疫组化染色步骤 | 第20页 |
| ·结果判断 | 第20页 |
| ·统计学方法 | 第20-21页 |
| ·Pokemon shRNA重组质粒的构建 | 第21-24页 |
| ·干扰序列设计 | 第21页 |
| ·序列合成 | 第21-22页 |
| ·单链目的基因磷酸化和退火 | 第22页 |
| ·pSHH-H1质粒酶切及回收 | 第22-23页 |
| ·线性质粒pSHH-H1与退火片段的连接 | 第23页 |
| ·制备感受态细菌 | 第23页 |
| ·转化感受态 | 第23页 |
| ·重组质粒的筛选及提取 | 第23-24页 |
| ·DNA序列测定 | 第24页 |
| ·shRNA重组质粒对OS-RC-2细胞中Pokemon的作用 | 第24-28页 |
| ·细胞培养 | 第24页 |
| ·细胞转染 | 第24-25页 |
| ·细胞形态学观察 | 第25页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第25页 |
| ·cDNA合成 | 第25-26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·PCR反应 | 第26页 |
| ·数据分析设置 | 第26-27页 |
| ·MTT法分析细胞增殖 | 第27页 |
| ·流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第27页 |
| ·统计学分析 | 第27-28页 |
| 第三章 实验结果 | 第28-34页 |
| ·Pokemon在肾癌组织中的表达及意义 | 第28-30页 |
| ·Pokemon蛋白在肾癌癌组织和癌旁正常组织中的表达 | 第28-29页 |
| ·Pokemon蛋白在肾癌中的表达与临床病理学指标的关系 | 第29-30页 |
| ·shRNA重组质粒对OS-RC-2细胞中Pokemon的抑制作用 | 第30-34页 |
| ·shRNA重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·转染后细胞的镜下观察 | 第30-31页 |
| ·shRNA重组质粒对Pokemon mRNA表达的抑制 | 第31-32页 |
| ·shRNA重组质粒对细胞生长活性的影响 | 第32页 |
| ·shRNA重组质粒对细胞凋亡的影响 | 第32-34页 |
| 第四章 结论 | 第34-39页 |
| ·主要结论 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·研究展望 | 第36-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 综述 | 第42-48页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 在学期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
