草鱼呼肠孤病毒(GCRV)感染性及其单克隆抗体的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-14页 |
| ·研究背景 | 第13页 |
| ·研究目的 | 第13-14页 |
| 第二章 文献综述 | 第14-21页 |
| ·鱼类细胞培养简介 | 第14-15页 |
| ·草鱼肾组织细胞系(CIK)简介 | 第15-16页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒(GCRV)概述 | 第16-20页 |
| ·生物学特性 | 第16-17页 |
| ·临床症状 | 第17-18页 |
| ·基因组特性 | 第18页 |
| ·结构蛋白特性 | 第18页 |
| ·基因组表达特性 | 第18-19页 |
| ·免疫特性 | 第19页 |
| ·检测与防治方法 | 第19-20页 |
| ·单克隆抗体技术简介 | 第20-21页 |
| 第三章 草鱼肾组织细胞系的培养 | 第21-27页 |
| ·材料与仪器 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·CIK 细胞的复苏 | 第21-22页 |
| ·CIK 细胞的传代 | 第22页 |
| ·细胞条件培养液的制备 | 第22页 |
| ·MTT 法检测 CIK 细胞增殖 | 第22页 |
| ·统计学处理 | 第22-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-25页 |
| ·MTT 法检测 CIK 细胞增殖结果 | 第23-25页 |
| ·镜下观察结果 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-27页 |
| 第四章 草鱼呼肠孤病毒毒力的检测 | 第27-34页 |
| ·材料与仪器 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验试剂 | 第27页 |
| ·实验仪器 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-29页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的传代 | 第28页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的纯化 | 第28页 |
| ·GCRV 体外毒力检测 | 第28页 |
| ·GCRV 体内毒力检测 | 第28-29页 |
| ·组织液致病性的检测 | 第29页 |
| ·统计学处理 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·GCRV 的培养结果 | 第29页 |
| ·GCRV 的电镜观察 | 第29-30页 |
| ·GCRV 体外毒力检测 | 第30页 |
| ·GCRV 体内毒力测定结果 | 第30-31页 |
| ·组织液复染结果 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第五章 草鱼呼肠孤病毒的免疫 | 第34-38页 |
| ·材料与仪器 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·实验仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·动物免疫 | 第34-35页 |
| ·抗血清的制备 | 第35页 |
| ·GCRV 感染检测板的制备 | 第35页 |
| ·抗血清间接免疫荧光检测 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第六章 杂交瘤细胞的制备与筛选 | 第38-43页 |
| ·材料与仪器 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏 | 第39页 |
| ·骨髓瘤细胞的培养 | 第39页 |
| ·饲养细胞及免疫小鼠脾脏细胞的制备 | 第39页 |
| ·细胞融合 | 第39-40页 |
| ·GCRV 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第40页 |
| ·GCRV 阳性杂交瘤细胞的扩增与冻存 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-41页 |
| ·细胞融合结果 | 第40-41页 |
| ·GCRV 阳性杂交细胞的筛选结果 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第七章 细胞克隆与单克隆抗体的制备 | 第43-47页 |
| ·材料与仪器 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验试剂 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·细胞亚克隆 | 第43-44页 |
| ·阳性杂交瘤细胞亚克隆的筛选 | 第44页 |
| ·阳性杂交瘤细胞亚克隆的扩增与冻存 | 第44页 |
| ·制备单克隆抗体 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-45页 |
| ·阳性杂交瘤细胞亚克隆的筛选 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第八章 抗 GCRV 单克隆抗体的应用 | 第47-49页 |
| ·材料与仪器 | 第47页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47页 |
| ·实验仪器 | 第47页 |
| ·方法 | 第47页 |
| ·病鱼肾脏冷冻切片的制备 | 第47页 |
| ·GCRV 间接免疫荧光检测 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第九章 结语 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 科研成果 | 第57页 |