| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-24页 |
| ·L-色氨酸的应用与制备 | 第14-17页 |
| ·L-色氨酸的应用 | 第14-15页 |
| ·色氨酸的制备 | 第15-17页 |
| ·L-色氨酸的微生物合成机制 | 第17-21页 |
| ·微生物合成 L-色氨酸的代谢途径 | 第17-18页 |
| ·微生物合成 L-色氨酸的调控机制 | 第18-21页 |
| ·L-色氨酸测定方法 | 第21-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-24页 |
| 第2章 大肠杆菌 aroG 基因第 175 位氨基酸残基突变菌的构建 | 第24-47页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·限制性内切酶和工具酶 | 第24页 |
| ·核酸、蛋白质分子量标准 | 第24页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第24-25页 |
| ·培养基及配制 | 第25页 |
| ·试剂配制 | 第25-27页 |
| ·方法 | 第27-37页 |
| ·引物设计与合成 | 第27页 |
| ·大肠杆菌基因组的获得 | 第27页 |
| ·AroGM175 片段的获得 | 第27-30页 |
| ·中间体 pGM-T-aroGM175 构建 | 第30-33页 |
| ·重组表达载体 pET-28b-aroGM175 构建 | 第33-34页 |
| ·重组子诱导及表达产物的分析 | 第34-37页 |
| ·结果和分析 | 第37-45页 |
| ·aroGM17512和 aroGM17534片断的扩增 | 第37页 |
| ·突变基因 aroGM175 全序列的扩增 | 第37-39页 |
| ·质粒 pGM-T-aroGM175 酶切鉴定 | 第39页 |
| ·目的基因序列的测定与分析 | 第39-41页 |
| ·表达载体 pET-28b-aroGM175 的构建及鉴定 | 第41-44页 |
| ·重组质粒 pET-28b-aroGM175 的蛋白表达及分析 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-47页 |
| 第3章 大肠杆菌 aroG 基因第 150 位氨基酸残基突变菌的构建 | 第47-62页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·菌种和质粒 | 第47页 |
| ·限制性内切酶和工具酶 | 第47页 |
| ·核酸、蛋白质分子量标准 | 第47页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第47页 |
| ·培养基及配制 | 第47页 |
| ·试剂配制 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-53页 |
| ·引物设计与合成 | 第48页 |
| ·大肠杆菌基因组的获得 | 第48页 |
| ·AroGM150 基因的克隆 | 第48-50页 |
| ·中间体 pGM-T-aroGM150 构建 | 第50-51页 |
| ·重组表达载体 pET-28b-aroGM150 构建 | 第51-52页 |
| ·重组子诱导及表达产物分析 | 第52页 |
| ·蛋白质定量 | 第52页 |
| ·Western-Blotting 分析 | 第52-53页 |
| ·结果和分析 | 第53-60页 |
| ·aroGM15012和 aroGM15034片断的扩增 | 第53页 |
| ·突变基因 aroGM150 全序列的扩增 | 第53-54页 |
| ·质粒 pGM-T-aroGM150 酶切鉴定 | 第54页 |
| ·pGM-T-aroGM150 测序结果 | 第54-56页 |
| ·重组子 pET-28b-aroGM150 的构建及鉴定 | 第56-59页 |
| ·重组质粒 pET-28b-aroGM150 的蛋白表达及分析 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 第4章 重组子 pACYCDuet-1-aroGM175 构建 | 第62-71页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·菌种和质粒 | 第62页 |
| ·限制性内切酶和工具酶 | 第62页 |
| ·核酸、蛋白质分子量标准 | 第62页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第62页 |
| ·培养基及配制 | 第62-63页 |
| ·试剂配制 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-65页 |
| ·重组表达载体 pACYCDuet-1-aroGM175 构建 | 第63-64页 |
| ·重组子 pACYCDuet-1-aroGM175 诱导表达 | 第64-65页 |
| ·重组子 pACYCDuet-1-aroGM175 诱导产物分析 | 第65页 |
| ·结果与分析 | 第65-69页 |
| ·重组表达载体 pACYCDuet-1-aroGM175 构建 | 第65-66页 |
| ·重组表达载体 pACYCDuet-1-aroGM175 测序鉴定 | 第66-68页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第68-69页 |
| ·本章小结 | 第69-71页 |
| 第5章 重组大肠杆菌发酵条件的初步探究 | 第71-84页 |
| ·材料 | 第71-72页 |
| ·菌种 | 第71页 |
| ·培养基 | 第71页 |
| ·仪器设备及试剂 | 第71-72页 |
| ·方法 | 第72-73页 |
| ·工程菌生长状态测定 | 第72页 |
| ·质粒稳定性测定 | 第72页 |
| ·葡萄糖标准曲线绘制 | 第72-73页 |
| ·葡萄糖浓度测定 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-83页 |
| ·培养温度对发酵的影响 | 第73-77页 |
| ·培养液初始 pH 值对发酵的影响 | 第77-80页 |
| ·不同装液量对发酵的影响 | 第80-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 全文结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-91页 |
| 作者攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
| 导师简介 | 第92-93页 |
| 作者简介 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
