| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-22页 |
| ·磷脂酶 A_2 | 第10-15页 |
| ·磷脂酶 A_2 | 第10-11页 |
| ·磷脂酶 A_2的来源 | 第11页 |
| ·磷脂酶 A_2的分类以及结构特点 | 第11-12页 |
| ·sPLA_2的结构特点 | 第12-13页 |
| ·sPLA_2的催化机理 | 第13页 |
| ·sPLA_2生理功能及其调节机制 | 第13-14页 |
| ·sPLA_2的应用 | 第14-15页 |
| ·包涵体复性 | 第15-21页 |
| ·包涵体形成的原因 | 第15-16页 |
| ·包涵体表达的优势 | 第16-17页 |
| ·包涵体复性原理 | 第17-19页 |
| ·包涵体提取与洗涤 | 第19页 |
| ·包涵体的溶解以及复性 | 第19-21页 |
| ·研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 紫红链霉菌 2917 磷脂酶 A_2重组载体的构建及其原核表达 | 第22-38页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌种和载体 | 第22页 |
| ·酶与分子量标准 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·培养基以及溶液 | 第22-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·sPLA_2的密码子的优化 | 第24-25页 |
| ·重组载体 pET-30c-sPLA_2的构建 | 第25-27页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第27-28页 |
| ·重组 sPLA_2蛋白诱导表达 | 第28页 |
| ·表达条件的优化 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-37页 |
| ·sPLA_2原基因的分析 | 第29-33页 |
| ·重组载体 pET-30c-sPLA_2的构建 | 第33-34页 |
| ·重组 sPLA_2蛋白诱导表达 | 第34-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 重组磷脂酶 A_2包涵体的初步复性 | 第38-47页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·菌种和主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要的培养基以及溶液 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·包涵体的提取 | 第40-41页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第41页 |
| ·包涵体的初步复性 | 第41页 |
| ·酶活性的测定 | 第41-42页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第42页 |
| ·目标蛋白含量测定 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-46页 |
| ·包涵体的提取以及洗涤 | 第43-44页 |
| ·包涵体初步复性 | 第44页 |
| ·重组 PLA_2酶活测定 | 第44-45页 |
| ·重组 PLA_2蛋白含量的测定 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 复性条件的优化以及复性后的重组磷脂酶 A_2酶学特性研究 | 第47-58页 |
| ·实验材料 | 第48-50页 |
| ·材料和试剂 | 第48页 |
| ·溶液配制 | 第48-49页 |
| ·主要设备 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·复性条件的优化 | 第50-51页 |
| ·重组磷脂酶 A_2酶学特性的研究 | 第51-52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-57页 |
| ·复性条件的优化 | 第52-54页 |
| ·重组磷脂酶 A_2酶学特性的研究 | 第54-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第五章 研究总结 | 第58-61页 |
| ·研究结论 | 第58-59页 |
| ·创新之处 | 第59页 |
| ·研究展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 论文发表 | 第67页 |