| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 中英文縮写对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1 杀菌/通透性增加蛋白概述及研究进展 | 第16-19页 |
| 2 其他主要猪抗病育种候选基因研究进展 | 第19-24页 |
| ·FUT1基因 | 第19-20页 |
| ·SLA Ⅱ类基因 | 第20-21页 |
| ·干扰素基因 | 第21-22页 |
| ·Toll样受体基因 | 第22-23页 |
| ·Mx1基因 | 第23-24页 |
| 3 本试验研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 猪BPI基因遗传变异及其对F18大肠杆菌抗性的效应分析 | 第25-37页 |
| 1 试验材料 | 第25-28页 |
| ·实验动物 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·实验试剂 | 第26-27页 |
| ·试剂配制 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-30页 |
| ·基因组DNA提取 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增产物的检测及PCR-RFLP分析 | 第29-30页 |
| ·测序 | 第30页 |
| ·BPI基因免疫指标测定 | 第30页 |
| ·仔猪体外大肠杆菌F18菌株粘附素受体鉴定 | 第30页 |
| 3 相关软件及统计方法 | 第30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-34页 |
| ·PCR-RFLP分析结果 | 第30-31页 |
| ·序列分析结果 | 第31页 |
| ·不同猪种BPI基因的基因型及其等位基因频率分析 | 第31-32页 |
| ·BPI基因第10外显子Hpa Ⅱ多态性及其与F18大肠杆菌感染间的关系 | 第32-33页 |
| ·基于BPI基因等位基因频率的聚类分析 | 第33-34页 |
| ·苏太猪中BPI基因与免疫指标关联分析 | 第34页 |
| 5 讨论 | 第34-37页 |
| 第三章 猪BPI基因表达及其与F18大肠杆菌抗性的关系 | 第37-48页 |
| 1 试验材料 | 第37-39页 |
| ·实验动物 | 第37-38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| 2 实验方法 | 第39-42页 |
| ·组织RNA的提取 | 第39页 |
| ·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳的检测 | 第39-40页 |
| ·基因组RNA的反转录 | 第40-41页 |
| ·cDNA合成 | 第40页 |
| ·PCR扩增目的DNA片段反应体系 | 第40-41页 |
| ·引物设计与合成 | 第41页 |
| ·荧光定量PCR反应体系及反应条件 | 第41页 |
| ·数据处理与分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-45页 |
| ·荧光定量实验结果 | 第42页 |
| ·荧光定量PCR的扩增曲线和溶解曲线 | 第42页 |
| ·BPI基因在不同组织中的相对表达 | 第42-43页 |
| ·BPI基因在不同发育时期空肠和十二指肠的相对表达 | 第43-44页 |
| ·BPI基因在梅山猪、大白猪和苏太猪之间相对表达 | 第44-45页 |
| ·BPI基因第10外显子Hpa Ⅱ3种基因型在空肠和十二指肠中的表达分析 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 猪BPI蛋白体外表达及生物信息学初步分析 | 第48-68页 |
| 1 实验材料 | 第48-49页 |
| 2 实验方法 | 第49-54页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第49-52页 |
| ·序列合成 | 第49页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·载体构建 | 第50-51页 |
| ·测序 | 第51页 |
| ·电转GS115菌种 | 第51-52页 |
| ·诱导表达 | 第52页 |
| ·目标蛋白在酵母中的表达优化和蛋白表达纯化 | 第52页 |
| ·原核表达载体构建 | 第52-53页 |
| ·真核表达载体构建 | 第53-54页 |
| ·载体构建与质粒制备 | 第53页 |
| ·瞬时转染及蛋白纯化 | 第53页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第53-54页 |
| ·Western blot检测 | 第54页 |
| ·蛋白结构分析 | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-66页 |
| ·酵母载体表达 | 第54-55页 |
| ·原核表达 | 第55-56页 |
| ·293-6E细胞表达 | 第56-58页 |
| ·猪BPI蛋白质结构分析 | 第58-66页 |
| ·BPI基因蛋白理化性质分析 | 第58页 |
| ·亚细胞定位 | 第58-59页 |
| ·BPI信号肽预测 | 第59-60页 |
| ·疏水性分析 | 第60页 |
| ·跨膜结构分析 | 第60-61页 |
| ·磷酸化位点分析 | 第61页 |
| ·保守结构域 | 第61-62页 |
| ·蛋白二级结构分析 | 第62页 |
| ·蛋白三级结构分析 | 第62-63页 |
| ·BPI的分子结构特征 | 第63-65页 |
| ·BPI信号通路 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 攻读学位期间发表和参与发表的学术论文目录 | 第79-81页 |
