| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 主要符号表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.MHCⅡ的结构与分布 | 第10-12页 |
| ·MHCⅡ分子结构 | 第10-12页 |
| ·MHCⅡ分布 | 第12页 |
| 2.MHCⅡ的功能和特点 | 第12-14页 |
| ·MHCⅡ经典生物功能 | 第12页 |
| ·参与抗原的加工与呈递 | 第12页 |
| ·参与免疫细胞间限制性识别 | 第12页 |
| ·MHCⅡ非经典生物学功能 | 第12-14页 |
| ·MHC 的遗传学特点 | 第14页 |
| 3.MHC 与疾病的关系 | 第14-16页 |
| 4.鸡 MHCⅡ研究的意义 | 第16页 |
| 5.脂质体转染法 | 第16-17页 |
| 6.细胞系的选择 | 第17页 |
| 7.国内外研究概况 | 第17页 |
| 8.研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 引言 | 第18-19页 |
| 1.材料与方法 | 第19-31页 |
| ·质粒、工程菌和细胞株 | 第19页 |
| ·主要工具酶与试剂 | 第19页 |
| ·主要试剂的配制 | 第19-21页 |
| ·培养细菌所用试剂 | 第19页 |
| ·细胞培养所用试剂 | 第19-20页 |
| ·制备感受态细胞所用试剂 | 第20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·鸡 MHCⅡ-β基因的合成 | 第21-28页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·提取鸡脾淋巴细胞 | 第21-22页 |
| ·鸡脾淋巴细胞中的 RNA 的提取 | 第22页 |
| ·合成 cDNA 第一链 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第23页 |
| ·PCR 产物的回收和纯化 | 第23-24页 |
| ·鸡 B-LB 基因真核荧光表达质粒的构建 | 第24-28页 |
| ·稳定表达 B-LB P815 细胞株的建立 | 第28-31页 |
| ·真核转染超纯质粒 DNA 的提取 | 第28页 |
| ·P815 细胞的复苏及传代 | 第28-29页 |
| ·G418 工作浓度的确定 | 第29页 |
| ·阳离子脂质体介导的转染 | 第29页 |
| ·稳定表达 B-LB P815 细胞株的 G418 筛选 | 第29页 |
| ·稳定表达 B-LB P815 细胞株的 RT-PCR 鉴定 | 第29-31页 |
| 2．结果与分析 | 第31-36页 |
| ·鸡 B-LB 基因 PCR 产物检测 | 第31页 |
| ·重组质粒 pEGFP-N1/B-LB 的双酶切与 PCR 鉴定 | 第31页 |
| ·重组质粒 pEGFP-N1/B-LB 的测序结果与序列分析 | 第31-33页 |
| ·瞬时转染 COS7 细胞荧光观察 | 第33-34页 |
| ·G418 筛选工作浓度确定 | 第34页 |
| ·稳定阳性克隆株 P815-GFP-B-LB RT-PCR 结果 | 第34-35页 |
| ·P815-GFP-B-LB 细胞株稳定性的鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3．讨论 | 第36-41页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第36-37页 |
| ·引物的设计及 B-LB 基因片段的获得 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第37-38页 |
| ·真核重组质粒稳定转染 | 第38-39页 |
| ·P815-GFP-B-LB 细胞株的 RT-PCR 检测 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 附录 | 第42-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
