| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 縮略语 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-52页 |
| 第一节 繁缕研究概况 | 第16-22页 |
| 1. 繁缕本草考证 | 第16-17页 |
| 2. 繁缕分类学研究 | 第17-18页 |
| 3. 繁缕植物化学研究 | 第18-19页 |
| 4. 繁缕分子系统学研究 | 第19-20页 |
| 5. 繁缕杂草学研究 | 第20页 |
| 6. 繁缕药用植物资源学研究 | 第20-22页 |
| 第二节 过氧化物酶研究进展 | 第22-32页 |
| 1. POD分子结构及组成 | 第22-24页 |
| 2. POD反应机理 | 第24-25页 |
| 3. POD分离纯化研究 | 第25-26页 |
| 4. POD的生理功能及其相关的分子生物学研究 | 第26-32页 |
| 第三节 核糖体失活蛋白研究进展 | 第32-41页 |
| 1. RIP类型和分布 | 第32-34页 |
| 2. RIP分子结构及组成 | 第34页 |
| 3. RIP酶学特性 | 第34-36页 |
| 4. RIP生理功能 | 第36-37页 |
| 5. RIP在异源生物中的表达 | 第37-39页 |
| 6. RIP在医学中的应用 | 第39-41页 |
| 本文研究目的和意义 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-52页 |
| 第二章 繁缕活性蛋白分离纯化 | 第52-66页 |
| 1. 材料和方法 | 第52-56页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·试剂与耗材 | 第52-53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| 2. 结果与分析 | 第56-63页 |
| ·繁缕总氨基酸成分测定 | 第56-57页 |
| ·蛋白粗提液制备 | 第57页 |
| ·活性蛋白分离纯化结果分析 | 第57-60页 |
| ·繁缕抗病毒蛋白导向分离 | 第60-61页 |
| ·活性蛋白纯度检测 | 第61-62页 |
| ·活性蛋白理化性质 | 第62-63页 |
| 3. 讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第三章 繁缕活性蛋白质谱分析 | 第66-80页 |
| 1. 材料和方法 | 第67-70页 |
| ·样品制备 | 第67-68页 |
| ·N-端氨基酸序列分析 | 第68页 |
| ·基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析 | 第68-69页 |
| ·四级杆飞行时间质谱(ESI-QUAD-TOF2)分析 | 第69-70页 |
| ·蛋白质序列数据库检索 | 第70页 |
| 2. 结果与分析 | 第70-76页 |
| ·N-端氨基酸序列分析 | 第70页 |
| ·MALDI-TOF MS分析 | 第70-73页 |
| ·ESI-QUAD-TOF2 MS分析 | 第73-76页 |
| 3. 讨论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 第四章 繁缕活性蛋白生物活性研究 | 第80-96页 |
| 1. 材料和方法 | 第80-85页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第80-81页 |
| ·抗HSV活性测定 | 第81-82页 |
| ·抑制肿瘤细胞活性测定 | 第82页 |
| ·RNA N-糖苷酶活性测定 | 第82-83页 |
| ·对超螺旋DNA的切割作用 | 第83页 |
| ·过氧化物酶活力测定 | 第83-85页 |
| 2. 结果与分析 | 第85-91页 |
| ·SAP抑制HSV-2活性研究 | 第85-87页 |
| ·SAP抑制肿瘤细胞活性测定 | 第87页 |
| ·繁缕蛋白组分及SAP的RNA N-糖苷酶活性 | 第87-88页 |
| ·对超螺旋DNA的切割作用 | 第88-89页 |
| ·SAP过氧化物酶活性测定 | 第89-91页 |
| 3. 讨论 | 第91-94页 |
| ·SAP抗病毒活性 | 第91-92页 |
| ·SAP抗肿瘤活性 | 第92页 |
| ·SAP RNA N-糖苷酶活性 | 第92-93页 |
| ·SAP DNA超螺旋裂解活性及抗病毒、抗肿瘤机理初探 | 第93-94页 |
| ·SAP过氧化物酶活性 | 第94页 |
| 参考文献 | 第94-96页 |
| 第五章 繁缕RIP基因克隆及序列分析 | 第96-112页 |
| 1. 材料与方法 | 第96-100页 |
| ·实验材料 | 第96-97页 |
| ·实验方法 | 第97-100页 |
| 2. 结果与分析 | 第100-108页 |
| ·繁缕总RNA提取 | 第100-101页 |
| ·繁缕总DNA提取 | 第101页 |
| ·繁缕RIP基因片段的扩增 | 第101-102页 |
| ·RACE扩增 | 第102-103页 |
| ·繁缕RIP基因全长的获得 | 第103-104页 |
| ·繁缕Q1、Q2基因序列比较与分析 | 第104-106页 |
| ·繁缕Q1、Q2编码氨基酸序列比较与分析 | 第106-108页 |
| 3. 讨论 | 第108-110页 |
| ·同源克隆的方法用于繁缕RIP基因的克隆 | 第108-109页 |
| ·繁缕Stellarin 1和Stellarin 2的特征分析 | 第109-110页 |
| ·繁缕抗病毒药效物质基础 | 第110页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 第六章 繁缕RIP基因原核表达 | 第112-124页 |
| 1. 材料与方法 | 第113-114页 |
| ·供试材料、菌株及质粒 | 第113页 |
| ·转化大肠杆菌、扩大培养 | 第113页 |
| ·质粒提取及Barn H Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切片段回收、连接、转化 | 第113页 |
| ·诱导外源基因表达 | 第113-114页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测表达的蛋白 | 第114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-120页 |
| ·转化大肠杆菌、扩大培养 | 第114页 |
| ·质粒提取及BamH Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切片段回收、连接、转化 | 第114-115页 |
| ·pET 29a-Q1、pET 29a-Q2的鉴定 | 第115-116页 |
| ·pET 29a-Q1、pET 29a-Q2中Q1、Q2基因的序列分析 | 第116页 |
| ·诱导外源基因表达 | 第116-120页 |
| 3. 讨论 | 第120-122页 |
| ·菌株和载体对Q1、Q2表达的影响 | 第120-121页 |
| ·培养基对Q1、Q2表达的影响 | 第121页 |
| ·Q1、Q2的诱导表达产物对菌株生长的影响 | 第121-122页 |
| ·Q1、Q2基因序列本身可能对表达的影响 | 第122页 |
| 参考文献 | 第122-124页 |
| 全文讨论与总结 | 第124-128页 |
| 1. 全文结论 | 第124-126页 |
| 2. 本文的创新点 | 第126页 |
| 3. 本文存在的不足和下一步工作 | 第126-128页 |
| 附录 | 第128-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第136页 |
