| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 本文部分缩写的中英文对照 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-28页 |
| 第一章 新城疫病毒的分子生物学研究进展 | 第15-21页 |
| 1 囊膜糖蛋白基因(F、HN) | 第15-16页 |
| 2 基质蛋白基因(M) | 第16-17页 |
| 3 核衣壳蛋白基因(NP) | 第17页 |
| 4 磷蛋白基因(P) | 第17-18页 |
| 5 大蛋白基因(L) | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-21页 |
| 第二章 假病毒的应用研究进展 | 第21-28页 |
| 1 假型病毒的特性 | 第21-22页 |
| 2 假型病毒的制备 | 第22-23页 |
| 3 假型病毒的应用 | 第23-26页 |
| ·病毒与宿主细胞间的相互作用 | 第23-24页 |
| ·中和抗体及抗原表位 | 第24页 |
| ·基因治疗 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-28页 |
| 第二篇 试验研究 | 第28-84页 |
| 第一章 不同禽源新城疫强毒株F、HN基因的克隆与序列分析 | 第28-51页 |
| 摘要： | 第28-29页 |
| 1 材料与方法 | 第29-32页 |
| ·病毒 | 第29页 |
| ·菌种、载体质粒和试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| ·病毒增殖及病毒RNA提取 | 第30页 |
| ·病毒增殖 | 第30页 |
| ·病毒RNA提取 | 第30页 |
| ·NDV F、HN基因的RT-PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第30-31页 |
| ·NDV基因cDNA的合成 | 第31页 |
| ·F、HN基因的扩增 | 第31页 |
| ·PCR产物的克隆与鉴定 | 第31页 |
| ·序列测定 | 第31-32页 |
| ·三种禽源F、HN基因系统发育进化树的构建 | 第32页 |
| ·NDV各毒株F基因限制性内切酶位点分布比较 | 第32页 |
| ·F、HN基因的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性比较 | 第32页 |
| ·三种禽源F、HN蛋白基因核苷酸序列推导氨基酸序列的异同 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-46页 |
| ·F基因结果与分析 | 第32-41页 |
| ·F基因RT-PCR扩增结果 | 第32-33页 |
| ·扩增产物克隆与鉴定结果 | 第33页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·鸡、鸭、鹅源NDV F基因(ORF)测序 | 第34-36页 |
| ·系统发育进化树的构建 | 第36-37页 |
| ·F基因上限制性内切酶(RE)位点分布结果 | 第37-39页 |
| ·F蛋白可变区部分氨基酸序列的比较 | 第39-40页 |
| ·F基因氨基酸、核苷酸序列同源性和致病力的比较 | 第40页 |
| ·三种禽源F蛋白基因核苷酸序列推导氨基酸序列的异同 | 第40-41页 |
| ·HN基因结果与分析 | 第41-46页 |
| ·HN基因RT-PCR扩增结果 | 第41页 |
| ·扩增产物克隆与鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·鸡、鸭、鹅源NDV HN基因(ORF)测序 | 第42-44页 |
| ·鸡、鸭、鹅源NDV HN基因系统发育进化树的构建 | 第44-45页 |
| ·二种禽源HN蛋白基因核苷酸序列推导氨基酸序列的异同 | 第45-46页 |
| ·HN基因核苷酸序列及推导氨基酸序列同源性的比较 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第二章 不同禽源新城疫强毒株NP、P、M基因的克隆与序列分析 | 第51-76页 |
| 摘要 | 第51-52页 |
| 1 材料与方法 | 第52-54页 |
| ·病毒 | 第52页 |
| ·菌种、载体质粒和试剂及主要仪器 | 第52页 |
| ·病毒增殖与纯化 | 第52页 |
| ·病毒RNA提取 | 第52-53页 |
| ·NDV NP、P及M基因的RT-PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·引物设计与合成 | 第53页 |
| ·NP、P、M基因的RT-PCR扩增 | 第53页 |
| ·NP、P、M基因PCR产物的克隆与鉴定 | 第53页 |
| ·NP、P、M基因序列测定及系统发育进化树的构建 | 第53-54页 |
| ·NP、P、M基因的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性比较 | 第54页 |
| ·三种禽源NP、P、M基因核苷酸序列及推导氨基酸序列的异同 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-72页 |
| ·NP基因结果与分析 | 第54-60页 |
| ·NP基因RT-PCR结果 | 第54页 |
| ·NP基因质粒酶切鉴定结果 | 第54-55页 |
| ·鸡、鸭、鹅源NDV NP基因(ORF)测序 | 第55-58页 |
| ·系统发育进化树的构建, | 第58-59页 |
| ·NP基因氨基酸、核苷酸序列同源性和致病力的比较 | 第59-60页 |
| ·三种禽源NP蛋白基因核昔酸序列推导氨基酸序列的异同 | 第60页 |
| ·P基因结果与分析 | 第60-66页 |
| ·P基因RT-PCR结果 | 第60页 |
| ·扩增产物克隆、鉴定 | 第60-61页 |
| ·鸡、鸭、鹅源NDV P基因(ORF)测序 | 第61-64页 |
| ·P基因的系统发育树进化分析 | 第64页 |
| ·核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性比较 | 第64-66页 |
| ·三种禽源P蛋白基因核苷酸序列推导氨基酸序列的异同 | 第66页 |
| ·M基因结果与分析 | 第66-72页 |
| ·M基因RT-PCR扩增结果 | 第66页 |
| ·扩增产物克隆、鉴定 | 第66-67页 |
| ·鸡、鸭、鹅源NDV M基因(ORF)测序 | 第67-69页 |
| ·M基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性比较 | 第69-70页 |
| ·M基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列系统发育分析 | 第70-72页 |
| ·三种禽源M蛋白基因核苷酸序列推导氨基酸序列的异同 | 第72页 |
| 3 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 第三章 新城疫病毒假型病毒体系的构建及生物活性分析 | 第76-84页 |
| 摘要 | 第76页 |
| 1 材料与方法 | 第76-78页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·细胞、病毒与质粒 | 第76页 |
| ·试剂 | 第76-77页 |
| ·方法 | 第77-78页 |
| ·PCR引物的设计 | 第77页 |
| ·PCR分离NDV的F、HN基因 | 第77页 |
| ·pcDNA-JF-Flag、pcDNA-JHN-F1ag重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第77-78页 |
| ·NDV假病毒的包装以及假病毒的收获 | 第78页 |
| ·NDV假型病毒感染HEK 293T细胞与Luciferase活性检测 | 第78页 |
| ·Western blot法检测HIV-1 p24蛋白在HEK 293T细胞中的表达 | 第78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-81页 |
| ·PCR分离NDV F、HN基因 | 第78-79页 |
| ·真核表达质粒pcDNA-JF-Flag、pcDNA-JHN-Flag的双酶切鉴定 | 第79-80页 |
| ·Western blot法检测F、HN蛋白在HEK 293T细胞中的表达 | 第80页 |
| ·NDV假病毒感染HEK 293T细胞后Luciferase活性检测 | 第80-81页 |
| ·Westenr blot法检测HIV-lp24蛋白在HEK293T细胞中的表达 | 第81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 全文结论 | 第84-86页 |
| 创新点 | 第86-87页 |
| 附录1 论文中所用的主要试剂及培养基的配制 | 第87-89页 |
| 附录2 论文中使用的重要实验技术 | 第89-91页 |
| 硕士期间发表和完成的论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
