摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
前言 | 第10-13页 |
第一部分 重组杆状病毒穿梭载体的构建及杆粒的获得 | 第13-31页 |
1 材料 | 第13-17页 |
·主要仪器设备 | 第13-14页 |
·主要试剂/试剂盒 | 第14-15页 |
·主要培养基及液体试剂的配制 | 第15-17页 |
2 方法 | 第17-27页 |
·重组穿梭载体pFastBac1-IFN/Fc的构建 | 第17-25页 |
·引物设计 | 第17页 |
·细胞总RNA的提取 | 第17-18页 |
·IFNα2b及IgG4 Fc基因的扩增 | 第18-19页 |
·目的基因克隆至表达载体pFastBac1 | 第19-25页 |
·重组杆粒Bacmid-IFN/Fc的获得 | 第25-27页 |
·DH10 Bac感受态细胞的制备 | 第25页 |
·转座重组 | 第25-27页 |
3 结果 | 第27-28页 |
·重组穿梭载体pFastBac1-IFN/Fc的鉴定 | 第27-28页 |
·重组穿梭载体构建 | 第27页 |
·重组穿梭载体pFastBac1-IFN/Fc的鉴定 | 第27-28页 |
·重组杆粒Bacmid-IFN/Fc的鉴定 | 第28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
5 结论 | 第30-31页 |
第二部分 重组融合蛋白IFN/Fc在昆虫细胞中的表达与检测 | 第31-43页 |
1 材料 | 第31-33页 |
·主要仪器设备 | 第31-32页 |
·主要试剂/试剂盒 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-39页 |
·重组杆状病毒的获得 | 第33-34页 |
·High Five细胞的培养及传代 | 第33页 |
·重组杆粒Bacmid-IFN/Fc转染High Five细胞 | 第33-34页 |
·融合蛋白IFN/Fc的表达与检测 | 第34-39页 |
·融合蛋白IFN/Fc的获得 | 第34-35页 |
·ELISA鉴定 | 第35页 |
·Western-Blot鉴定 | 第35-39页 |
·体外抗病毒活性测定 | 第39页 |
3 结果 | 第39-41页 |
·重组杆状病毒的包装 | 第39-40页 |
·融合蛋白IFN/Fc的表达与检测 | 第40-41页 |
·ELISA鉴定融合蛋白IFN/Fc | 第40页 |
·Western-Blot鉴定融合蛋白IFN/Fc | 第40页 |
·体外抗病毒活性测定 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
附图 | 第43-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |
综述 | 第48-62页 |
参考文献 | 第56-62页 |
英文缩略词表 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
个人简历 | 第65页 |