邻苯二甲酸二丁酯的酶联免疫吸附分析研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1. 绪论 | 第12-22页 |
| ·邻苯二甲酸二丁酯的性质及应用 | 第12页 |
| ·邻苯二甲酸二丁酯的残留和人群暴露 | 第12-14页 |
| ·邻苯二甲酸二丁酯的危害 | 第14-16页 |
| ·邻苯二甲酸酯类化合物的检测方法 | 第16-18页 |
| ·色谱法 | 第16-17页 |
| ·免疫分析法 | 第17-18页 |
| ·有机小分子酶联免疫吸附分析技术 | 第18-21页 |
| ·人工抗原的制备 | 第18-19页 |
| ·抗体的制备 | 第19-21页 |
| ·有机小分子酶联免疫吸附分析的类型 | 第21页 |
| ·选题的目的及意义 | 第21-22页 |
| 2.材料与方法 | 第22-37页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第22-24页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要溶液 | 第22-23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-37页 |
| ·半抗原的合成及结构鉴定 | 第24-25页 |
| ·人工抗原的合成及结构鉴定 | 第25-26页 |
| ·BALB/c小鼠免疫 | 第26-27页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第27页 |
| ·抗血清灵敏度的测定 | 第27-28页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第28-31页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析 | 第31页 |
| ·单克隆抗体的亚型分析 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第32页 |
| ·人工抗原包被ELISA检测方法的建立与优化 | 第32-34页 |
| ·半抗原包被的间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第34-35页 |
| ·单抗特异性分析 | 第35-36页 |
| ·水样中DBP的添加回收试验及检测 | 第36页 |
| ·消费品中DBP含量的检测 | 第36-37页 |
| 3. 结果 | 第37-53页 |
| ·半抗原结构的鉴定 | 第37页 |
| ·人工抗原结构的鉴定 | 第37-39页 |
| ·紫外光谱 | 第37-38页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
| ·抗血清效价 | 第39页 |
| ·抗血清灵敏度 | 第39-40页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第40-41页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析 | 第41页 |
| ·单克隆抗体亚型分析 | 第41-42页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第42页 |
| ·人工抗原包被ELISA检测条件的优化 | 第42-49页 |
| ·最适包被抗原浓度和抗体工作浓度的确定 | 第42-44页 |
| ·竞争反应温度的确定 | 第44页 |
| ·有机溶剂的种类及含量的影响 | 第44-45页 |
| ·竞争反应体系pH的影响 | 第45-46页 |
| ·竞争反应体系离子强度的影响 | 第46-47页 |
| ·竞争反应体系去污剂含量的影响 | 第47页 |
| ·封闭剂的选择 | 第47-48页 |
| ·人工抗原包被的间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第48-49页 |
| ·半抗原包被的间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第49-50页 |
| ·最适包被半抗原浓度和单抗工作浓度的确定 | 第49-50页 |
| ·半抗原包被的间接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第50页 |
| ·单抗特异性分析 | 第50-51页 |
| ·水样中邻苯二甲酸二丁酯的添加回收率 | 第51-52页 |
| ·消费品中邻苯二甲酸二丁酯含量的检测 | 第52-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-61页 |
| ·邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的合成 | 第53页 |
| ·免疫方案 | 第53-54页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第54-56页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第54页 |
| ·杂交瘤细胞的选择培养 | 第54-55页 |
| ·单克隆抗体纯化方法 | 第55-56页 |
| ·反应条件对间接竞争ELISA的影响 | 第56-57页 |
| ·半抗原包被ELISA | 第57-59页 |
| ·单克隆抗体的特异性 | 第59-60页 |
| ·邻苯二甲酸二丁酯的ELISA检测 | 第60-61页 |
| 5. 结论与展望 | 第61-62页 |
| 6. 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录1 主要英文缩写词 | 第67-68页 |
| 附录2 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70页 |