| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| ·防御素的研究进展 | 第12-14页 |
| ·防御素的定义及分类 | 第12-13页 |
| ·防御素的生物学作用及其机制 | 第13-14页 |
| ·禽防御素的研究进展 | 第14-17页 |
| ·禽防御素分子结构 | 第15页 |
| ·禽防御素蛋白的表达 | 第15页 |
| ·禽防御素的生物学特性 | 第15-16页 |
| ·禽防御素的组织分布及诱导性表达 | 第16-17页 |
| ·防御素抗感染的信号转导机制 | 第17-18页 |
| ·鸭肝炎病毒 | 第18页 |
| ·研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·菌株、载体质粒及重组蛋白 | 第19页 |
| ·试剂与仪器 | 第19-20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·实验动物样品 | 第20页 |
| ·鸭AvBD基因的克隆与序列分析 | 第20-25页 |
| ·组织总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·反转录(RT) | 第21页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第21-22页 |
| ·PCR产物的回收 | 第22页 |
| ·PCR产物的连接 | 第22-23页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23页 |
| ·重组质粒的提取 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24页 |
| ·序列分析及同源性比较 | 第24-25页 |
| ·重组鸭AvBD1、5和16蛋白在原核中的表达 | 第25-28页 |
| ·原核表达载体的构建与测序 | 第25-27页 |
| ·重组鸭AvBD1、5和16蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·重组鸭AvBD1、5和16蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白的合成 | 第28-29页 |
| ·重组与合成鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白的抗菌活性测定 | 第29页 |
| ·盐离子浓度对重组和合成鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白抗菌活性的影响 | 第29页 |
| ·重组和合成鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白对鸭红细胞的溶血活性 | 第29页 |
| ·重组鸭AvBD1、3、5、6和16的体外抗病毒活性的测定 | 第29-30页 |
| ·检测鸭AvBDs、IL-2、IL-18、IFN-γ、TLR-7经鸭肝炎病毒诱导后的组织表达差异 | 第30-32页 |
| ·实验动物及组织样品的采集 | 第30页 |
| ·cDNA模板和标准品的制备 | 第30-31页 |
| ·检测鸭AvBDs、IL-2、IL-18、IFN-γ、TLR-7组织表达差异 | 第31-32页 |
| ·数据统计与分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-58页 |
| ·鸭AvBD1、3、5、6和16基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·测序结果与分析 | 第34-36页 |
| ·鸭AvBD1、3、5、6和16基因的遗传进化分析 | 第36-38页 |
| ·重组鸭AvBD1、5和16蛋白的原核表达与纯化 | 第38-42页 |
| ·表达用重组质粒pMD18-duckAvBD1、5和16的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组表达质粒pGEX-duckAvBD1、5、16的鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组鸭AvBD1、5和16蛋白的原核表达与纯化 | 第40-42页 |
| ·重组和合成鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白的抗菌活性 | 第42页 |
| ·盐离子浓度对重组和合成鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白抗菌活性的影响 | 第42-46页 |
| ·重组和合成鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白对鸭红细胞的溶血活性 | 第46页 |
| ·重组鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白的抗病毒活性 | 第46-47页 |
| ·鸭AvBDs、1L-2、IL-18、IFN-γ、TLR-7经鸭肝炎病毒诱导后的组织表达差异 | 第47-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·鸭AvBD1、3、5、6和16基因的克隆与遗传进化分析 | 第58页 |
| ·重组鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白的原核表达 | 第58-59页 |
| ·重组和合成鸭AvBD1、3、5、6和16蛋白的生物学特性 | 第59-60页 |
| ·鸭AvBDs、IL-2、IL-18、IFN-γ、TLR-7经鸭肝炎病毒诱导后的组织表达差异 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录 | 第71-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第75页 |
