农杆菌介导EPSPS抗草甘膦基因转化马铃薯品种
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-29页 |
| ·研究目的与意义 | 第11-12页 |
| ·草甘膦国内外研究动态 | 第12-18页 |
| ·草甘膦的概况 | 第12页 |
| ·草甘膦的理化特性 | 第12页 |
| ·草甘膦的作用特点 | 第12-13页 |
| ·草甘膦的毒性机理 | 第13-16页 |
| ·草甘膦的降解 | 第16-18页 |
| ·抗草甘膦作物主要研究动态 | 第18-21页 |
| ·获得草甘膦抗性的途径 | 第18-19页 |
| ·抗草甘膦作物选育的研究动态 | 第19-20页 |
| ·抗草甘膦作物的创制与应用 | 第20-21页 |
| ·马铃薯遗传转化的方法 | 第21-27页 |
| ·农杆菌介导法 | 第21-26页 |
| ·基因枪法 | 第26页 |
| ·微束激光穿刺转化法 | 第26页 |
| ·聚乙二醇(PEG)法 | 第26-27页 |
| ·超声波介导法 | 第27页 |
| ·马铃薯抗除草剂基因工程育种研究概况 | 第27-28页 |
| ·转基因马铃薯的展望 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·试验材料 | 第29-31页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·试剂和酶 | 第29-30页 |
| ·仪器设备 | 第30页 |
| ·激素和抗生素 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-40页 |
| ·农杆菌活化与保存 | 第31页 |
| ·农杆菌介导转化马铃薯的方法 | 第31-32页 |
| ·马铃薯遗传转化影响因素的探讨 | 第32-33页 |
| ·转EPSPS基因抗性植株的分子检测 | 第33-38页 |
| ·T_1代转基因植株的田间草甘膦抗性检测 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-50页 |
| ·遗传转化体系影响因素探讨 | 第40-44页 |
| ·薯片再生培养基的确定 | 第40-41页 |
| ·农杆菌浓度及侵染时间对遗传转化的影响 | 第41-42页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第42-43页 |
| ·脱菌剂对遗传转化的影响 | 第43页 |
| ·PPT浓度对抗性芽诱导的影响 | 第43-44页 |
| ·PPT浓度对抗性芽生根的影响 | 第44页 |
| ·转基因植株的获得 | 第44页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第44-48页 |
| ·转基因植株的PCR分析 | 第44-45页 |
| ·转基因植株的PCR-Southern杂交 | 第45-46页 |
| ·转基因植株转录水平分析 | 第46-47页 |
| ·转基因植株的Southern杂交 | 第47-48页 |
| ·T_1代转基因植株的PCR结果 | 第48页 |
| ·转基因植株的抗草甘膦鉴定 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| ·薯片再生培养基的确定 | 第50页 |
| ·农杆菌浓度及侵染时间对遗传转化的影响 | 第50页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第50-51页 |
| ·脱菌剂的选择 | 第51页 |
| ·RT-PCR检测的注意事项 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 图版 | 第64-68页 |
| 图版说明 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69页 |