| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略语表（ABBREVIATION) | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·泛素研究进展 | 第12-13页 |
| ·病毒感染与泛素化修饰 | 第13-15页 |
| ·PRRSV非结构蛋白研究进展 | 第15-17页 |
| ·Nsp11研究进展 | 第17-20页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第3章 材料和方法 | 第21-35页 |
| ·试验材料 | 第21-26页 |
| ·毒株与菌株 | 第21页 |
| ·细胞以及转染相关材料 | 第21页 |
| ·载体构建所需材料及获赠载体 | 第21-23页 |
| ·Western Bolt及免疫沉淀实验材料 | 第23-24页 |
| ·培养基及其配制 | 第24页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制：Western Blotting相关试剂 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-35页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第26页 |
| ·PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第26页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第26-27页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第27-28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第28-30页 |
| ·质粒的构建 | 第30-33页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第33页 |
| ·Western Blot样品制备 | 第33页 |
| ·免疫共沉淀技术检测蛋白泛素化水平 | 第33-34页 |
| ·PRRSV感染与去泛素化试验 | 第34页 |
| ·统计学方法 | 第34-35页 |
| 第4章 结果与分析 | 第35-47页 |
| ·PRRSV感染对细胞蛋白泛素化的影响 | 第35-36页 |
| ·PRRSV非结构蛋白真核表达质粒的构建与鉴定 | 第36-38页 |
| ·筛选PRRSV具有去泛素化活性的非结构蛋白及Nsp11去泛素化活性的检测 | 第38-39页 |
| ·Nsp11去除K48泛素,但不影响K63泛素 | 第39-40页 |
| ·H144、K173、D180和Y219位点对Nsp11的DUB活性很重要 | 第40-42页 |
| ·Nsp11去泛素化活性对其抑制NF-κB的激活至关重要 | 第42-44页 |
| ·Nsp11去除K48泛素抑制IκBα降解进而抑制NF-κB激活 | 第44-47页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
