| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 缩写词简表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-14页 |
| 技术路线 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第15-30页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·细胞系 | 第15页 |
| ·细胞培养用材料 | 第15页 |
| ·质粒 | 第15页 |
| ·试剂 | 第15-17页 |
| ·方法 | 第17-30页 |
| ·miR-126稳定表达的结肠癌细胞系构建 | 第17-26页 |
| ·稳定表达miR-126的SW480细胞系的功能研究 | 第26-28页 |
| ·验证数据库预测的miR-126的靶基因 | 第28-29页 |
| ·统计学软件及分析 | 第29-30页 |
| 第三章 结果 | 第30-44页 |
| 第一部分 miR-126稳定表达的结肠癌细胞系的构建 | 第30-36页 |
| ·PCR 扩増 pre-miR-126 序列 | 第30页 |
| ·表达载体的线性化 | 第30-31页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第31页 |
| ·阳性克隆测序 | 第31页 |
| ·慢病毒包装成功的鉴定 | 第31-32页 |
| ·慢病毒滴度测定 | 第32页 |
| ·慢病毒感染SW480细胞MOI值的确定 | 第32-33页 |
| ·慢病毒感染SW480后的荧光表达情况 | 第33-34页 |
| ·real-time PCR检测miR-126在慢病毒感染后的SW480中的表达 | 第34-36页 |
| 第二部分 miR-126在其稳定表达的SW480细胞系中的功能研究 | 第36-42页 |
| ·MTT实验检测miR-126对SW480细胞生长增殖能力的影响 | 第36-37页 |
| ·划痕实验检测miR-126对SW480细胞迁移能力的影响 | 第37-38页 |
| ·Transwell无基质胶检测miR-126对SW480细胞迁移能力的影响 | 第38-39页 |
| ·Transwell加基质胶检测miR-126对SW480细胞侵袭能力的影响 | 第39-40页 |
| ·采用流式细胞仪分析miR-126对SW480细胞周期的影响 | 第40-41页 |
| ·流式细胞仪分析miR-126对SW480细胞凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 第三部分 real-time PCR验证数据库预测的miR-126的靶基因 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-49页 |
| 第一部分 利用慢病毒载体构建miR-126稳定表达的结肠癌细胞系 | 第45页 |
| 第二部分 miR-126在其稳定表达的结肠癌细胞系中的细胞生物学功能研究 | 第45-47页 |
| 第三部分 验证数据库预测的miR-126的下游靶基因 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 综述 | 第54-62页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第63页 |
