| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| ·国内外研究进展 | 第13-21页 |
| ·植原体的发现与分类 | 第13-14页 |
| ·植原体的特性 | 第14-17页 |
| ·植原体的致病机制 | 第17-21页 |
| ·本研究的目的意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和载体 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·PCR 引物 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-39页 |
| ·植原体效应蛋白基因 MPEP 的克隆 | 第23-25页 |
| ·桑树叶片（含植原体）DNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·PCR 扩增 | 第24页 |
| ·目的片段回收 | 第24页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接、转化 | 第25页 |
| ·序列测定 | 第25页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| ·MPEP 序列分析 | 第25页 |
| ·MPEP 的基本特性分析 | 第25-26页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 的分泌性分析 | 第26-28页 |
| ·MPEP 原核穿梭表达载体的构建与鉴定 | 第26-27页 |
| ·枯草芽孢杆菌 Lu-144 感受态细胞制备及转化 | 第27页 |
| ·MPEP 在枯草芽孢杆菌中的分泌表达 | 第27-28页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 原核表达载体的构建及融合蛋白诱导表达 | 第28-29页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 在植物中的亚细胞定位分析 | 第29-33页 |
| ·MPEP-GFP 融合蛋白植物表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·农杆菌 GV3101 感受态细胞制备及转化 | 第30页 |
| ·拟南芥的无土栽培和转化 | 第30-32页 |
| ·拟南芥的无土栽培 | 第30-31页 |
| ·拟南芥的转化 | 第31页 |
| ·转基因植株的 PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| ·MPEP 在植物中的亚细胞定位分析 | 第32-33页 |
| ·MPEP 在拟南芥根尖细胞中亚细胞定位观察 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的洋葱表皮细胞瞬时表达系统构建及 MPEP 的亚细胞定位观察 | 第32-33页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 的致病性分析 | 第33-35页 |
| ·MPEP 植物表达载体构建 | 第33页 |
| ·转 MPEP 基因的拟南芥表型分析 | 第33页 |
| ·MPEP 表达对拟南芥代谢组影响的气质联用分析 | 第33-35页 |
| ·拟南芥代谢物的提取 | 第34页 |
| ·代谢物的衍生化 | 第34页 |
| ·GC-MS 分析 | 第34页 |
| ·样本原始数据预处理与主成分分析 | 第34-35页 |
| ·植原体溶血素蛋白基因 MDPH 的克隆 | 第35-36页 |
| ·PCR 扩增 | 第35页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第35页 |
| ·转化和筛选 | 第35页 |
| ·阳性克隆质粒的 PCR 鉴定 | 第35-36页 |
| ·植原体溶血素蛋白 MDPH 的生物信息学分析 | 第36页 |
| ·MDPH 氨基酸序列同源性分析 | 第36页 |
| ·MDPH 理化特性分析 | 第36页 |
| ·MDPH 原核诱导表达与 SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第36页 |
| ·目的蛋白的诱导表达与 SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
| ·MDPH 植物表达载体构建及转基因植株的表型分析 | 第37-39页 |
| ·MDPH 植物表达载体构建 | 第37页 |
| ·转 MDPH 基因的拟南芥表型分析 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-69页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 基因的克隆及序列特征 | 第39-40页 |
| ·MPEP 的克隆 | 第39页 |
| ·MPEP 序列特征 | 第39-40页 |
| ·MPEP 蛋白的理化特性 | 第40-43页 |
| ·MPEP 蛋白的结构 | 第40-41页 |
| ·MPEP 蛋白的信号肽 | 第41-42页 |
| ·MPEP 蛋白的亲水性 | 第42-43页 |
| ·MPEP 蛋白的跨膜区 | 第43页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 的分泌性 | 第43-44页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 的原核诱导表达与 SDS-PAGE 分析 | 第44-46页 |
| ·原核表达载体 pET30a-MPEP-GFP 的构建 | 第44-45页 |
| ·MPEP-GFP 蛋白的诱导表达与 SDS-PAGE 分析 | 第45-46页 |
| ·MPEP 蛋白在植物体内的亚细胞定位 | 第46-47页 |
| ·植原体效应蛋白 MPEP 的致病性 | 第47-59页 |
| ·植物表达载体 pBI121-MPEP 的构建 | 第47-48页 |
| ·MPEP 的致病性 | 第48-49页 |
| ·MPEP 对拟南芥代谢组的影响 | 第49-59页 |
| ·植原体溶血素基因 MDPH 的克隆 | 第59-61页 |
| ·MDPH 编码蛋白质的结构和基本理化性质 | 第61-65页 |
| ·MDPH 的原核诱导表达 | 第65-66页 |
| ·植物表达载体 pBI121-MDPH 的构建及转 MDPH 基因拟南芥表型 | 第66-69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| ·MPEP 的作用机制 | 第69页 |
| ·MDPH 的致病作用 | 第69-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 硕士研究生期间发表的论文 | 第83页 |
