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水稻茎叶特异性表达基因的筛选及其启动子功能的初步分析

目录第1-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-9页
前言第9-10页
第1章 启动子的研究概述第10-22页
   ·启动子的结构第10-13页
     ·启动子核心元件第10-12页
       ·转录起始位点第10页
       ·TATA-box第10-11页
       ·5’-非翻译序列第11页
       ·起始因子第11-12页
     ·启动子上游元件第12-13页
       ·CAAT-box第12页
       ·GC-box第12页
       ·增强子第12-13页
       ·沉寂子第13页
       ·一些特殊的启动子上游元件第13页
   ·植物启动子的分类和应用第13-22页
     ·组成型启动子第13-14页
       ·CaMV35S 启动子第14页
       ·Ubiquitin 启动子第14页
       ·Act1 启动子第14页
       ·Nos 启动子和 Ocs 启动子第14页
     ·诱导型启动子第14-16页
       ·光诱导型启动子第15页
       ·热诱导型启动子第15页
       ·激素诱导型启动子第15页
       ·创伤诱导表达启动子第15-16页
       ·真菌及共生菌诱导表达启动子第16页
     ·组织特异型启动子第16-20页
       ·营养器官中的组织特异型启动子第16-18页
       ·生殖器官中的组织特异型启动子第18-20页
     ·双向启动子、可变启动子第20-22页
第2章 水稻茎叶特异性表达基因的筛选第22-30页
   ·材料与试剂第22页
     ·实验材料第22页
     ·实验试剂第22页
   ·实验方法第22-24页
     ·应用数据库的查找水稻茎叶特异性表达的基因第22-23页
     ·提取水稻 RNA 及反转录合成 cDNA第23页
     ·半定量 PCR 分析第23-24页
     ·实时荧光定量 PCR 分析第24页
     ·对所筛选出的 LOC_Os01g28500 基因进行功能和蛋白结构域的分析第24页
   ·结果与分析第24-30页
     ·查找生物信息学数据库获得候选基因第24-26页
     ·半定量 PCR 分析候选基因的表达模式第26-28页
     ·荧光定量 PCR 分析 LOC_Os01g28500 基因的表达模式第28-29页
     ·LOC_Os01g28500 基因的功能和蛋白质结构域特征第29-30页
第3章 LOC_Os01g28500 基因启动子的克隆及功能分析第30-38页
   ·材料与试剂第30页
     ·实验材料第30页
     ·菌株和质粒第30页
     ·主要试剂第30页
   ·实验方法第30-33页
     ·LOC_Os01g28500 基因启动子区的分析第30页
     ·LOC_Os01g28500 基因的启动子不同片段长度的克隆第30-31页
     ·构建启动子与 GUS 基因融合表达载体第31页
     ·基因组 DNA 的提取第31-32页
     ·转基因植株的分子检测第32-33页
       ·转基因植株的潮霉素抗性检测第32页
       ·转基因植株的 PCR 检测第32页
       ·转基因植株的 GUS 活性检测第32-33页
   ·结果和分析第33-38页
     ·LOC_Os01g28500 基因的启动子序列特征第33-34页
     ·LOC_Os01g28500 基因启动子缺失克隆策略第34页
     ·LOC_Os01g28500 启动子-GUS 表达载体的构建第34-35页
     ·转基因植株叶片潮霉素抗性筛选第35-36页
     ·转基因植株的 PCR 扩增第36-37页
     ·转基因植株的 GUS 表达部位检测第37-38页
第4章 讨论第38-40页
   ·茎叶特异性表达基因及其启动子筛选的意义第38页
   ·茎叶特异性表达基因 LOC_Os01g28500 的研究第38页
   ·茎叶特异性启动子的调控基序研究第38-40页
参考文献第40-50页
附录 1 实验方法第50-54页
附录 2 部分候选基因筛选的 RT-PCR 引物信息第54-56页
附录 3 LOC_Os01g28500 序列信息第56-58页
附录 4 LOC_Os01g28500 基因启动子元件第58-62页
附录 5 克隆 LOC_Os01g28500 启动子测序 Blast 分析第62-64页
附录 6 LOC_Os01g28500 启动子-GUS 融合表达载体图谱第64-69页
致谢第69页

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