| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一部分 食管鳞癌组织中mTOR及p-p70S6K蛋白表达的相关性及临床意义 | 第17-25页 |
| 前言 | 第17页 |
| 1 材料和方法 | 第17-20页 |
| ·仪器与设备 | 第17页 |
| ·组织标本 | 第17-18页 |
| ·免疫组织化学相关试剂 | 第18页 |
| ·主要溶液的配制方法 | 第18页 |
| ·免疫组织化学实验方法及步骤 | 第18-19页 |
| ·结果判定 | 第19-20页 |
| ·统计学处理 | 第20页 |
| 2 结果 | 第20-23页 |
| ·食管鳞癌组织中mTOR蛋白的表达及其与临床生物学行为的关系 | 第20-21页 |
| ·食管鳞癌组织中p-p70S6K蛋白的表达及其与临床生物学行为的关系 | 第21-23页 |
| ·mTOR及p-p70S6K在食管鳞癌组织中表达的相关性分析 | 第23页 |
| 3 讨论 | 第23-25页 |
| 第二部分 p70S6K在食管鳞癌细胞中的表达情况及其在细胞增殖中的作用 | 第25-51页 |
| 第一章 雷帕霉素对食管鳞癌细胞系中p70S6K表达的影响 | 第25-38页 |
| 前言 | 第25页 |
| 1 材料和方法 | 第25-34页 |
| ·材料 | 第25-29页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第25-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·常用试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-33页 |
| ·细胞株及细胞培养 | 第29页 |
| ·雷帕霉素母液的配制方法 | 第29-30页 |
| ·Western blotting实验方法 | 第30-33页 |
| ·统计学处理方法 | 第33-34页 |
| 2 结果 | 第34-36页 |
| ·三种细胞株中蛋白浓度测定结果 | 第34页 |
| ·三种细胞株中p70S6K及p-p70S6K的蛋白表达 | 第34-35页 |
| ·雷帕霉素对p70S6K及p-p70S6K蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 shRNA干扰p70S6K表达后食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素敏感性的变化 | 第38-51页 |
| 前言 | 第38页 |
| 1 主要材料和方法 | 第38-45页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-45页 |
| ·细胞株及细胞培养 | 第39页 |
| ·RT-PCR引物 | 第39-40页 |
| ·常用液体试剂的配制 | 第40页 |
| ·RT-PCR实验方法 | 第40-42页 |
| ·p70S6K-shRNA表达载体转染EC9706细胞并筛选稳定表达株 | 第42-43页 |
| ·MTT法检测雷帕霉素对细胞增殖的影响 | 第43-45页 |
| 2 结果 | 第45-48页 |
| ·稳定表达细胞株 | 第45-46页 |
| ·细胞总RNA电泳结果 | 第46页 |
| ·p70S6K-shRNA稳定转染RT-PCR结果 | 第46-47页 |
| ·shRNA干扰p70S6K前后食管鳞癌EC9706细胞的增殖情况 | 第47页 |
| ·下调p70S6K表达前后雷帕霉素对EC9706细胞增殖的影响 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 综述 mTOR信号通路及其抑制剂研究进展 | 第56-69页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 个人简历 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
