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血红素加氧酶/一氧化碳信号系统参与调控渗透胁迫下小麦种子的萌发以及幼苗的脱黄化

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略词表第12-14页
第一章 文献综述第14-31页
 第一部分 血红素加氧酶/一氧化碳信号系统研究进展第14-17页
  一、血红素加氧酶的生物学功能第14-16页
  二、一氧化碳第16-17页
 第二部分 种子萌发机理以及受干旱胁迫的影响第17-19页
 第三部分 植物光信号转导途径研究进展第19-25页
  一、光环境和植物光受体第20页
  二、光敏色素与光信号转导第20-25页
 第四部分 植物一氧化氮研究进展第25-30页
  一、NO产生途径的研究进展第25-27页
  二、NO的生理功能第27-29页
  三、NO的信号转导第29-30页
 第五部分 开展本研究的目的和意义第30-31页
第二章 结果与分析第31-88页
 第一部分 血红素加氧酶/一氧化碳信号系统参与调控渗透胁迫下小麦种子的萌发第31-56页
  1 材料与方法第32-36页
   ·试剂第32页
   ·CO溶液的制备第32页
   ·材料与处理第32-33页
   ·萌发实验第33页
   ·TBARS含量的测定第33页
   ·HO活性检测第33页
   ·利用气质联用仪(GC-MS)检测CO的含量第33页
   ·还原糖、可溶性糖的提取与测定第33页
   ·总淀粉酶以及结合态β-淀粉酶活性测定第33-34页
   ·抗氧化酶的提取及活性测定第34页
   ·蛋白含量的测定第34-35页
   ·总RNA的提取和半定量RT-PCR第35页
   ·采用Greiss试剂以及EPR方法测定NO的含量第35-36页
   ·统计分析第36页
  2 结果与分析第36-53页
   ·小麦种子萌发率对不同浓度PEG处理再恢复过程的应答差异第36-37页
   ·不同浓度PEG处理再恢复过程中小麦种子TBARS含量、HO活性以及HO-1转录本的变化第37-39页
   ·外源HO-1诱导剂Hematin以及CO气体饱和溶液以浓度依赖的方式逆转了25% PEG胁迫对小麦种子萌发的抑制第39-41页
   ·HO-1的抑制剂ZnPPIX和NO的专一性清除剂cPTIO阻断了Hematin对25%PEG胁迫导致的小麦种子荫发抑制的缓解效应第41-42页
   ·Hematin对25% PEG胁迫下小麦种子萌发过程中HO活性的诱导作用第42-43页
   ·Hematin和ZnPPⅨ对25% PEG胁迫下小麦种子萌发过程中HO-1基因表达及CO释放量的影响第43-45页
   ·Hematin、SNP、ZnPPIX和cPTIO对25% PEG胁迫下小麦种子萌发过程中糖含量以及淀粉酶活性的影响第45-47页
   ·Hematin、SNP、ZnPPⅨ和cPTIO对25% PEG胁迫下小麦种子中萌发过程中TBARS含量的影响第47-48页
   ·Hematin、ZnPPⅨ和cPTIO对25% PEG胁迫下小麦种子中萌发过程中抗氧化酶活性及其相应转录本的影响第48-49页
   ·NO可能参与Hematin诱导的25% PEG胁迫下小麦种子的萌发第49-53页
  3 讨论第53-56页
 第二部分 血红素加氧酶/一氧化碳信号系统参与调控小麦幼苗的脱黄化第56-75页
  1 材料与方法第57-60页
   ·实验材料第57页
   ·试剂第57-58页
   ·处理第58页
   ·CO饱和水溶液的制备第58页
   ·叶绿素含量测定第58页
   ·HO的提取和活性测定第58页
   ·Western blot检测HO-1蛋白表达第58-59页
   ·利用气质联用仪(GC-MS)检测CO的含量第59页
   ·光敏色素含量测定第59页
   ·蛋白质含量的分析第59页
   ·总RNA的提取和半定量RT-PCR第59-60页
   ·采用Greiss试剂以及LSCM测定NO的含量第60页
   ·统计分析第60页
  2 结果与分析第60-71页
   ·光处理对小麦幼苗脱黄化过程中HO/CO信号系统的诱导效应第60-61页
   ·光诱导的小麦幼苗脱黄化过程对HO-1的抑制剂ZnPPⅨ敏感第61-62页
   ·HO-1的诱导剂Hematin以及CO气体饱和溶液可以在黑暗条件下缓解黄化幼苗叶绿素的降解第62-64页
   ·Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP处理诱导黄化小麦幼苗中HO活性以及HO-1表达量的迅速提高第64-67页
   ·动物NOS的抑制剂L-NAME和NO的专一性清除剂cPTIO阻断了Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP对黄化幼苗叶绿素降解的挽救作用第67-68页
   ·光、Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP处理诱导黄化幼苗脱黄化过程中内源N #0的释放第68-71页
   ·Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP处理诱导黄化幼苗中光敏色素的累积第71页
  3 讨论第71-75页
 第三部分 小麦HO-1基因的克隆第75-88页
  1 材料与方法第75-77页
   ·实验材料第75页
   ·总RNA的提取及逆转录第75页
   ·小麦HO-1基因序列的引物设计及克隆第75-76页
   ·同源搜索分析第76页
   ·氨基酸序列及聚类分析第76-77页
   ·胁迫处理第77页
   ·半定量RT-PCR第77页
  2 结果与分析第77-87页
   ·小麦HO-1基因的电子克隆第77页
   ·HO-1基因保守区片段的克隆与分析第77-78页
   ·小麦HO-1全长拼接cDNA的克隆与分析第78-85页
   ·HO-1基因5’端序列的扩增第85-86页
   ·半定量RT-PCR检测HO-1基因在各种胁迫下的表达第86-87页
  3 讨论第87-88页
参考文献第88-100页
全文结论第100-102页
创新之处第102-104页
致谢第104页

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