摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-31页 |
第一部分 血红素加氧酶/一氧化碳信号系统研究进展 | 第14-17页 |
一、血红素加氧酶的生物学功能 | 第14-16页 |
二、一氧化碳 | 第16-17页 |
第二部分 种子萌发机理以及受干旱胁迫的影响 | 第17-19页 |
第三部分 植物光信号转导途径研究进展 | 第19-25页 |
一、光环境和植物光受体 | 第20页 |
二、光敏色素与光信号转导 | 第20-25页 |
第四部分 植物一氧化氮研究进展 | 第25-30页 |
一、NO产生途径的研究进展 | 第25-27页 |
二、NO的生理功能 | 第27-29页 |
三、NO的信号转导 | 第29-30页 |
第五部分 开展本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
第二章 结果与分析 | 第31-88页 |
第一部分 血红素加氧酶/一氧化碳信号系统参与调控渗透胁迫下小麦种子的萌发 | 第31-56页 |
1 材料与方法 | 第32-36页 |
·试剂 | 第32页 |
·CO溶液的制备 | 第32页 |
·材料与处理 | 第32-33页 |
·萌发实验 | 第33页 |
·TBARS含量的测定 | 第33页 |
·HO活性检测 | 第33页 |
·利用气质联用仪(GC-MS)检测CO的含量 | 第33页 |
·还原糖、可溶性糖的提取与测定 | 第33页 |
·总淀粉酶以及结合态β-淀粉酶活性测定 | 第33-34页 |
·抗氧化酶的提取及活性测定 | 第34页 |
·蛋白含量的测定 | 第34-35页 |
·总RNA的提取和半定量RT-PCR | 第35页 |
·采用Greiss试剂以及EPR方法测定NO的含量 | 第35-36页 |
·统计分析 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-53页 |
·小麦种子萌发率对不同浓度PEG处理再恢复过程的应答差异 | 第36-37页 |
·不同浓度PEG处理再恢复过程中小麦种子TBARS含量、HO活性以及HO-1转录本的变化 | 第37-39页 |
·外源HO-1诱导剂Hematin以及CO气体饱和溶液以浓度依赖的方式逆转了25% PEG胁迫对小麦种子萌发的抑制 | 第39-41页 |
·HO-1的抑制剂ZnPPIX和NO的专一性清除剂cPTIO阻断了Hematin对25%PEG胁迫导致的小麦种子荫发抑制的缓解效应 | 第41-42页 |
·Hematin对25% PEG胁迫下小麦种子萌发过程中HO活性的诱导作用 | 第42-43页 |
·Hematin和ZnPPⅨ对25% PEG胁迫下小麦种子萌发过程中HO-1基因表达及CO释放量的影响 | 第43-45页 |
·Hematin、SNP、ZnPPIX和cPTIO对25% PEG胁迫下小麦种子萌发过程中糖含量以及淀粉酶活性的影响 | 第45-47页 |
·Hematin、SNP、ZnPPⅨ和cPTIO对25% PEG胁迫下小麦种子中萌发过程中TBARS含量的影响 | 第47-48页 |
·Hematin、ZnPPⅨ和cPTIO对25% PEG胁迫下小麦种子中萌发过程中抗氧化酶活性及其相应转录本的影响 | 第48-49页 |
·NO可能参与Hematin诱导的25% PEG胁迫下小麦种子的萌发 | 第49-53页 |
3 讨论 | 第53-56页 |
第二部分 血红素加氧酶/一氧化碳信号系统参与调控小麦幼苗的脱黄化 | 第56-75页 |
1 材料与方法 | 第57-60页 |
·实验材料 | 第57页 |
·试剂 | 第57-58页 |
·处理 | 第58页 |
·CO饱和水溶液的制备 | 第58页 |
·叶绿素含量测定 | 第58页 |
·HO的提取和活性测定 | 第58页 |
·Western blot检测HO-1蛋白表达 | 第58-59页 |
·利用气质联用仪(GC-MS)检测CO的含量 | 第59页 |
·光敏色素含量测定 | 第59页 |
·蛋白质含量的分析 | 第59页 |
·总RNA的提取和半定量RT-PCR | 第59-60页 |
·采用Greiss试剂以及LSCM测定NO的含量 | 第60页 |
·统计分析 | 第60页 |
2 结果与分析 | 第60-71页 |
·光处理对小麦幼苗脱黄化过程中HO/CO信号系统的诱导效应 | 第60-61页 |
·光诱导的小麦幼苗脱黄化过程对HO-1的抑制剂ZnPPⅨ敏感 | 第61-62页 |
·HO-1的诱导剂Hematin以及CO气体饱和溶液可以在黑暗条件下缓解黄化幼苗叶绿素的降解 | 第62-64页 |
·Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP处理诱导黄化小麦幼苗中HO活性以及HO-1表达量的迅速提高 | 第64-67页 |
·动物NOS的抑制剂L-NAME和NO的专一性清除剂cPTIO阻断了Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP对黄化幼苗叶绿素降解的挽救作用 | 第67-68页 |
·光、Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP处理诱导黄化幼苗脱黄化过程中内源N #0的释放 | 第68-71页 |
·Hematin、CO气体饱和溶液以及SNP处理诱导黄化幼苗中光敏色素的累积 | 第71页 |
3 讨论 | 第71-75页 |
第三部分 小麦HO-1基因的克隆 | 第75-88页 |
1 材料与方法 | 第75-77页 |
·实验材料 | 第75页 |
·总RNA的提取及逆转录 | 第75页 |
·小麦HO-1基因序列的引物设计及克隆 | 第75-76页 |
·同源搜索分析 | 第76页 |
·氨基酸序列及聚类分析 | 第76-77页 |
·胁迫处理 | 第77页 |
·半定量RT-PCR | 第77页 |
2 结果与分析 | 第77-87页 |
·小麦HO-1基因的电子克隆 | 第77页 |
·HO-1基因保守区片段的克隆与分析 | 第77-78页 |
·小麦HO-1全长拼接cDNA的克隆与分析 | 第78-85页 |
·HO-1基因5’端序列的扩增 | 第85-86页 |
·半定量RT-PCR检测HO-1基因在各种胁迫下的表达 | 第86-87页 |
3 讨论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-100页 |
全文结论 | 第100-102页 |
创新之处 | 第102-104页 |
致谢 | 第104页 |