| Contents | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| ABSTRACT | 第14-17页 |
| Chapter 1 Introduction | 第17-27页 |
| Literature cited | 第21-27页 |
| Chapter 2 Review of literature | 第27-49页 |
| 1 Chicken and exogenous gene | 第27-39页 |
| 2 Immortalization of oviduct cells and intron effect | 第39-42页 |
| 3 Effects of drilling eggs on hatchablity | 第42-43页 |
| 4 Literature cited | 第43-49页 |
| Chapter 3 Oviduct specific expression of tissue plasminogene activator | 第49-81页 |
| 1 Introduction | 第49-50页 |
| 2 Materials and Methods | 第50-60页 |
| ·The construction of oviduct specific vector | 第50-54页 |
| ·pL-EGFP plasmid construction | 第50-51页 |
| ·Culture of 3T3 Cells | 第51页 |
| ·pL-EGFP plasmid in Vitro transfection | 第51-52页 |
| ·Cloning of human tissue plasminogene activator | 第52页 |
| ·SignalP in (tPA) | 第52页 |
| ·pL-tPAGFP plasmid in invitro transfection | 第52-53页 |
| ·Ovalbumin promoter | 第53页 |
| ·Isolation of DNA | 第53-54页 |
| ·Amplification of ovalbumin promoter | 第54页 |
| ·pL-2.8OVtPAGFP plasmid | 第54页 |
| ·Preparation of plasmid DNA | 第54-56页 |
| ·Oviduct epithelial cells | 第56页 |
| ·pL-2.8OVtPAGFP plasmid transfection in vitro | 第56-57页 |
| ·pL-2.8OVtPAGFP plasmid transfection in vivo | 第57页 |
| ·Dynamic expression of (tPA) in treated hen and eggs | 第57-58页 |
| ·Western blotting | 第57页 |
| ·Detection of GFP in tissue sections | 第57-58页 |
| ·Fibrinolytic activity of tPA | 第58页 |
| ·Injection of lentivirus (pL-2.8OVtPAGFP) in eggs | 第58-59页 |
| ·Lentivirus production | 第58-59页 |
| ·Egg injection | 第59页 |
| ·Egg incubation | 第59页 |
| ·Growth of Go generation | 第59页 |
| ·Transgene detection | 第59-60页 |
| ·Genomic DNA | 第59-60页 |
| ·Detection of GFP in tissue sections | 第60页 |
| 3 Results | 第60-68页 |
| ·The construction of oviduct specific vector | 第60-64页 |
| ·pL-eGFP vector | 第60-61页 |
| ·pL-tPAGFP vector | 第61-62页 |
| ·SignalP-NN | 第62-63页 |
| ·Transfection of pL-tPAGFP with CEF and cPG cells | 第63页 |
| ·pL-2.8OVtPAGFP vector | 第63-64页 |
| ·Oviduct epithelial cells | 第64-65页 |
| ·Temporal expression of EGFP in cultured cells | 第65页 |
| ·In vivo expression of pL-2.8OVtPAGFP by wing vein injection in hens | 第65-67页 |
| ·Western blotting | 第65-66页 |
| ·Fibrinolytic activity of tPA | 第66页 |
| ·Temporal expression of GFP gene in tissues of hens | 第66-67页 |
| ·Expression of (tPA) in hatched chicks | 第67-68页 |
| ·PCR analysis of G0 and G1 generation | 第67-68页 |
| ·Temporal expression of GFP gene in tissues | 第68页 |
| 4 Discussion | 第68-74页 |
| ·Plasmid construction | 第68-69页 |
| ·Oviduct epithelial cells transfection with oviduct specific plasmid | 第69-70页 |
| ·Dynamic secretion of (tPA) in egg white and tissues of treated hens | 第70-72页 |
| ·Western blotting | 第70-71页 |
| ·GFP expression in vector injected hens | 第71页 |
| ·Fibrinolsysis of tPA | 第71-72页 |
| ·Expression of (tPA) in G0 and G1 generation | 第72-74页 |
| ·Transgene detection | 第72-73页 |
| ·GFP expression in tissues of hatched chicks | 第73-74页 |
| 5 Conclusion | 第74-75页 |
| 6 Literature cited | 第75-81页 |
| Chapter 4 Oviduct specific expression of human recombinant leptin | 第81-91页 |
| 1 Introduction | 第81-82页 |
| 2 Materials and Methods | 第82-83页 |
| ·Construction of oviduct specific vector (pL-OV-Leptin) | 第82页 |
| ·Preparation of plasmid DNA | 第82页 |
| ·Signal peptide in leptin | 第82页 |
| ·Lentivirus production | 第82页 |
| ·Egg injection | 第82-83页 |
| ·Egg incubation | 第83页 |
| ·Growth of G0 and G1 generation | 第83页 |
| ·Transgenic detection | 第83页 |
| ·Genomic analysis | 第83页 |
| 3 Results | 第83-86页 |
| ·The construction of pL-OV-Leptin | 第83-86页 |
| ·pUC-OV-Leptin | 第83-84页 |
| ·Signal peptide | 第84-85页 |
| ·pL-OV-Leptin vector | 第85-86页 |
| ·Transgenic detecting | 第86页 |
| 4 Discussion | 第86-88页 |
| 5 Conclusion | 第88页 |
| 6 Literature cited | 第88-91页 |
| Chapter 5 Effect of frist intron on ovalbumin promoter activity | 第91-107页 |
| 1 Introduction | 第91-92页 |
| 2 Material and Methods | 第92-94页 |
| ·Construction of pL-CTAGNEO vector | 第92页 |
| ·Oviduct specific vectors | 第92-93页 |
| ·Virus production | 第93页 |
| ·Culture of oviduct cells | 第93页 |
| ·In vitro transfection | 第93页 |
| ·Efficiency of promoter | 第93页 |
| ·Semi-Quantitative RT-PCR | 第93-94页 |
| 3 Results | 第94-100页 |
| ·pL-CTAGBC plasmid | 第94-95页 |
| ·pl-CTAGNEO plasmid | 第95页 |
| ·PCR products of ovalbumin promoter | 第95-96页 |
| ·Oviduct specific vector pL-OV1345tPAGFP | 第96-97页 |
| ·Oviduct specific vector pL-OV2964tPAGFP | 第97页 |
| ·Culture of oviduct cells and their immotalization | 第97-98页 |
| ·Integration efficiency of oviduct specific vectors | 第98-100页 |
| ·GFP DNA | 第98-99页 |
| ·GFP mRNA | 第99-100页 |
| 4 Discussion | 第100-101页 |
| 5 Conclusion | 第101-102页 |
| 6 Literature cited | 第102-107页 |
| Chapter 6 Modified method of egg shell windowing and sealing | 第107-116页 |
| 1 Introduction | 第107页 |
| 2 Materails and Methods | 第107-109页 |
| ·Fertilized eggs | 第107-108页 |
| ·Vector construction | 第108页 |
| ·Egg injection | 第108页 |
| ·Egg incubation | 第108页 |
| ·Dead embryo examination | 第108-109页 |
| ·Statistical analysis | 第109页 |
| 3 Results | 第109-111页 |
| ·Percentage of hatched, dead embryo and eggs without embryo | 第109页 |
| ·Dead embryo percentage of 10 days pre and post | 第109-110页 |
| ·Percentage of eggs embryo (Hateched and dead) and without embryo | 第110-111页 |
| 4 Discussion | 第111-113页 |
| 5 Conclusion | 第113页 |
| 6 Literature cited | 第113-116页 |
| Innovaitions | 第116-117页 |
| Material used | 第117-121页 |
| Abbreviations | 第121-123页 |
| Ovalbumin promoter sequences | 第123-129页 |
| Publication List | 第129-131页 |
| Acknowledgments | 第131页 |
