| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-26页 |
| ·黄萎病菌的真菌学和致病机理 | 第15-18页 |
| ·黄萎病菌的真菌分类学地位 | 第15页 |
| ·黄萎病菌的致病机理 | 第15-17页 |
| ·黄萎病菌的致病因子 | 第17-18页 |
| ·植物的防卫反应机制 | 第18-19页 |
| ·针对寄生营养型病原菌的防卫反应 | 第18页 |
| ·针对腐生营养型病原菌的防卫反应 | 第18-19页 |
| ·抗黄萎病相关基因的分离与克隆 | 第19页 |
| ·乙烯信号转导途径与其它防卫信号途径的"交谈"作用 | 第19-23页 |
| ·基因对基因抗性信号转导途径 | 第19-20页 |
| ·水杨酸信号转导途径 | 第20-21页 |
| ·茉莉酸信号转导途径 | 第21-22页 |
| ·诱导系统抗性信号转导途径和脱落酸信号途径 | 第22-23页 |
| ·乙烯转录因子在植物防卫反应中的作用 | 第23-24页 |
| ·乙烯转录因子家族 | 第23页 |
| ·乙烯转录因子对下游防卫基因的调控 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 棉花抗黄萎病相关基因GhERF和GhHRGP的表达特性及同源性聚类分析 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·病原菌和棉花材料 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-33页 |
| ·大丽轮枝菌的培养及粗毒素的制备 | 第26-27页 |
| ·棉花材料的培养及处理方法 | 第27页 |
| ·棉花材料总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·去除总RNA中的基因组DNA | 第28-29页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR检测棉花抗病相关基因 | 第30页 |
| ·半定量RT-PCR检测表达量 | 第30-32页 |
| ·蛋白质序列比对和同源性聚类分析 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·GhERF和GhHRGP的毒素诱导表达 | 第33页 |
| ·GhERF和GhHRGP的乙烯诱导表达 | 第33-35页 |
| ·GhERF氨基酸序列的进化分析 | 第35-37页 |
| ·GhHRGP氨基酸序列的进化分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 GhERF和GhHRGP植物表达载体的构建和GhHRGP遗传转化的研究 | 第40-58页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·受体材料 | 第40页 |
| ·菌株和载体 | 第40页 |
| ·所用试剂 | 第40-41页 |
| ·所用仪器 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-51页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第41-50页 |
| ·棉花受体材料幼苗的培养 | 第50页 |
| ·农杆菌菌株的培养 | 第50页 |
| ·农杆菌菌株对棉花组织的侵染 | 第50-51页 |
| ·棉花愈伤组织的诱导 | 第51页 |
| ·棉花胚性愈伤组织的诱导 | 第51页 |
| ·胚状体的培养 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-55页 |
| ·GhERF植物表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·GhHRGP植物表达载体的构建 | 第52页 |
| ·获得了GhHRGP转基因棉花的胚状体和胚芽 | 第52-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第四章 棉花黄萎病菌对拟南芥的致病性 | 第58-69页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·病原菌 | 第58页 |
| ·寄主植物 | 第58页 |
| ·所用试剂 | 第58页 |
| ·所用仪器 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59-62页 |
| ·病原菌的培养和拟南芥的培养 | 第59页 |
| ·拟南芥的种植和移植 | 第59-60页 |
| ·粗提毒素的制备 | 第60-61页 |
| ·黄萎病菌孢子悬浮液的浓度测定 | 第61页 |
| ·对拟南芥进行毒素处理和接种孢子悬浮液 | 第61-62页 |
| ·结果 | 第62-67页 |
| ·大丽轮枝菌毒素对拟南芥幼苗的致病性 | 第62-66页 |
| ·叶片针刺接种孢子悬浮液的结果 | 第66-67页 |
| ·伤根接种孢子悬浮液的结果 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 GhERF转基因拟南芥植株的获得和功能分析 | 第69-86页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·农杆菌菌株 | 第69页 |
| ·拟南芥受体材料 | 第69页 |
| ·病原菌材料 | 第69页 |
| ·所用试剂 | 第69页 |
| ·所用仪器 | 第69-70页 |
| ·方法 | 第70-80页 |
| ·农杆菌培养 | 第70页 |
| ·农杆菌菌株对拟南芥的侵染和T_0代种子的收获 | 第70页 |
| ·转基因拟南芥纯合子的筛选 | 第70-71页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第71-72页 |
| ·转基因植株的表达检测 | 第72-75页 |
| ·GhERF对下游防卫基因的表达调控检测 | 第75-80页 |
| ·转基因拟南芥植株对毒素处理的抗性鉴定 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-83页 |
| ·转基因拟南芥T_0代种子的获得 | 第80-81页 |
| ·纯合子的获得 | 第81页 |
| ·GhERF转基因拟南芥植株基因组水平的检测 | 第81页 |
| ·GhERF转基因拟南芥植株表达水平的检测 | 第81-82页 |
| ·GhERF对下游防卫基因的表达调控检测 | 第82页 |
| ·GhERF转基因拟南芥植株的抗性鉴定 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| 第六章 结论 | 第86-89页 |
| ·主要结论 | 第86-87页 |
| ·后续工作 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 附录 所用培养基、母液和缓冲液配制方法 | 第95-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 作者简历 | 第100页 |
