中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-26页 |
·体节研究背景和进展 | 第11-22页 |
·体节发生的过程和特点 | 第11-13页 |
·体节发生的模型研究 | 第13-16页 |
·体节发生的分子调控途径 | 第16-22页 |
·细胞周期因子Gem在细胞周期和发育中的作用 | 第22-25页 |
·细胞周期因子Geminin在细胞周期的作用 | 第22-24页 |
·细胞周期因子Geminin在胚胎发育中的作用 | 第24-25页 |
·目的和预期结果 | 第25-26页 |
2 材料和方法 | 第26-42页 |
·实验动物及饲养 | 第26页 |
·试剂、耗材和仪器 | 第26-27页 |
·培养基和有关主要试剂的配置 | 第27-30页 |
·LB培养基的配制: | 第27页 |
·10×TBE琼脂糖凝胶电泳缓冲液的配制 | 第27页 |
·30×Danieau's solution(PH7.6) | 第27-28页 |
·western blot相关溶液的配制 | 第28-29页 |
·原位杂交相关溶液配制: | 第29-30页 |
·cell death杂交溶液的配制 | 第30页 |
·antibody staining相关溶液的配制 | 第30页 |
·其他相关溶液配制 | 第30页 |
·质粒和菌株 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-42页 |
·斑马鱼总RNA的提取 | 第30-31页 |
·反转录制备cDNA | 第31-32页 |
·重组质粒的构建 | 第32-35页 |
·反义探针的制备 | 第35-36页 |
·胚胎注射和细胞移植 | 第36-37页 |
·全胚胎原位杂交(Whole mount in situ hybridization) | 第37-40页 |
·整胚抗体显色反应(whole mount antibody staing) | 第40页 |
·细胞凋亡原位杂交 | 第40-41页 |
·Western Blot | 第41-42页 |
3 实验结果 | 第42-57页 |
·Gem MO阻断Geminin的翻译 | 第42页 |
·Geminin在早期胚胎中的表达模式 | 第42-43页 |
·Gem通过调控细胞周期调控了体节发生频率 | 第43-47页 |
·Gem通过调控RA—FGF8的表达来调控体节大小的发生 | 第47-49页 |
·Gem通过Mib依赖与非依赖性两种方式调控体节发生的Notch信号途径 | 第49-53页 |
·Gem在体节形成过程中体节极性分化和细胞的间充质—表皮化转换的作用(MET) | 第53-54页 |
·Notch在振荡基因协调表达中起主导作用,而PSM区域细胞周期变化与振荡基因协调表达没紧密联系 | 第54-57页 |
4 讨论 | 第57-62页 |
·Gem MO导致的体节发生延迟与体节发生的细胞周期模型 | 第57-58页 |
·Gem对体节发生中反向浓度梯度RA和FGF8的调控。 | 第58-59页 |
·细胞周期、Notch信号途径与体节发生时钟基因表达的关系。 | 第59-60页 |
·Gem在体节发生中的调控方式和调控路线。 | 第60-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
6 展望及欲开展工作 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
致谢 | 第74页 |