| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-23页 |
| 1 镰刀菌的分类 | 第9-10页 |
| 2 镰刀菌鉴定方法 | 第10-14页 |
| ·形态学鉴定 | 第10-11页 |
| ·酯酶同工酶技术 | 第11页 |
| ·血清学检测 | 第11页 |
| ·分子生物学检测 | 第11-13页 |
| ·基因芯片技术 | 第13-14页 |
| ·红外光谱鉴别 | 第14页 |
| 3 质谱技术 | 第14页 |
| 4 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱及应用 | 第14-19页 |
| ·基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 | 第14-15页 |
| ·MALDI TOF MS原理 | 第15-16页 |
| ·MALDI TOF MS应用 | 第16-19页 |
| ·多肽与蛋白质 | 第16页 |
| ·DNA与RNA | 第16页 |
| ·高分子化合物 | 第16页 |
| ·小分子化合物 | 第16-17页 |
| ·微生物检测 | 第17-19页 |
| ·真菌检测 | 第17-18页 |
| ·细菌检测 | 第18-19页 |
| ·病毒检测 | 第19页 |
| 5 活性检测研究 | 第19-22页 |
| ·MTT法及其改良法 | 第19-20页 |
| ·SRB法 | 第20页 |
| ·LDH释放法 | 第20页 |
| ·同位素掺入法 | 第20页 |
| ·酸性磷酸酶法 | 第20-21页 |
| ·克隆形成实验 | 第21页 |
| ·活性检测在植物病原菌和酵母上的应用 | 第21页 |
| ·传统活性检测方法的优缺点 | 第21-22页 |
| 6 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第一部分 28种镰刀菌MALDI TOF MS分析 | 第23-55页 |
| 材料与方法 | 第23-31页 |
| 1 实验材料 | 第23-26页 |
| ·供试菌株 | 第23-25页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·基质 | 第25页 |
| ·酶 | 第25页 |
| ·其它试剂 | 第25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·基质溶剂 | 第25-26页 |
| ·基质溶液 | 第26页 |
| ·样品处理用溶剂 | 第26页 |
| ·校正标准样品的制备 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-31页 |
| ·供试菌的培养 | 第26页 |
| ·样品处理 | 第26-29页 |
| ·溶剂处理 | 第27页 |
| ·单一溶剂处理 | 第27页 |
| ·组合溶剂处理 | 第27页 |
| ·不同基质及基质溶剂的试验 | 第27页 |
| ·菌量试验 | 第27页 |
| ·点样方法的筛选 | 第27-28页 |
| ·样品点样量的筛选 | 第28页 |
| ·水洗培养物次数的筛选 | 第28页 |
| ·超声处理时间的筛选 | 第28页 |
| ·蜗牛酶处理 | 第28-29页 |
| ·不同浓度的蜗牛酶处理 | 第28-29页 |
| ·试验蜗牛酶的作用及和溶剂处理确定的较好方法进行比较 | 第29页 |
| ·MALDI TOF分析 | 第29-30页 |
| ·仪器参数设置 | 第29页 |
| ·标准品质量数校正 | 第29页 |
| ·图谱分析 | 第29-30页 |
| ·图谱的标峰 | 第29-30页 |
| ·图谱的校正 | 第30页 |
| ·图谱的数据库搜索 | 第30页 |
| ·数据库的建立 | 第30页 |
| ·重复性试验 | 第30页 |
| ·同一样品的重复性试验 | 第30页 |
| ·批间样品的重复性试验 | 第30页 |
| ·方法的适用性 | 第30-31页 |
| ·同属内不同种真菌的鉴定 | 第31页 |
| ·同种内不同株真菌的鉴定 | 第31页 |
| 结果与分析 | 第31-55页 |
| 1 样品处理方法的确定 | 第31-48页 |
| ·溶剂处理 | 第31-35页 |
| ·单一溶剂处理 | 第31-34页 |
| ·组合溶剂处理 | 第34-35页 |
| ·不同基质及基质溶剂试验 | 第35-36页 |
| ·菌量试验 | 第36-38页 |
| ·点样方法筛选 | 第38-39页 |
| ·样品点样量筛选 | 第39-40页 |
| ·水洗培养物次数筛选 | 第40-41页 |
| ·超声处理时间筛选 | 第41-42页 |
| ·蜗牛酶处理 | 第42-46页 |
| ·不同浓度的蜗牛酶处理 | 第42-44页 |
| ·酶处理上清液分析 | 第44页 |
| ·试验蜗牛酶的作用及和溶剂处理确定的较好方法进行比较 | 第44-46页 |
| ·标准试验方法的确定 | 第46-48页 |
| 2 重复性试验 | 第48-50页 |
| ·同一样品的重复性试验 | 第48-49页 |
| ·批间样品的重复性试验 | 第49-50页 |
| 3 方法的适用性 | 第50-54页 |
| ·同属内不同种真菌的鉴定 | 第50-53页 |
| ·同种真菌不同菌株的鉴定 | 第53-54页 |
| 4 数据库的建立 | 第54-55页 |
| 第二部分 SDS病菌北美种活性检测研究 | 第55-73页 |
| 材料与方法 | 第56-60页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·供试菌株 | 第56-57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·溶液、培养基的配制 | 第57页 |
| ·常用仪器 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-60页 |
| ·大豆猝死综合症北美种F.virguliforme的培养 | 第57页 |
| ·孢子的获取及孢子悬浮液的配制 | 第57-58页 |
| ·孢子萌发培养时间的筛选 | 第58页 |
| ·样品孢子致死温度的筛选 | 第58页 |
| ·染料适用性筛选 | 第58-59页 |
| ·SYTO、PI处理方法 | 第58-59页 |
| ·单染浓度的筛选 | 第58页 |
| ·SYTO单染用量的筛选 | 第58页 |
| ·PI单染用量的筛选 | 第58页 |
| ·死、活孢子悬浮液不同比例混合 | 第58-59页 |
| ·ViaCount处理方法 | 第59页 |
| ·染料用量的筛选 | 第59页 |
| ·死、活孢子悬浮液不同比例混合 | 第59页 |
| ·染色时间的筛选 | 第59页 |
| ·不同温度-时间处理时间处理后的活性检测 | 第59页 |
| ·单细胞微量分析系统参数的调整及样品检测 | 第59页 |
| ·萌发试验 | 第59-60页 |
| 结果与分析 | 第60-68页 |
| 1 孢子萌发培养时间的筛选 | 第60页 |
| 2 样品孢子致死温度的筛选 | 第60页 |
| 3 染料的适用性筛选结果 | 第60-63页 |
| ·SYTO/PI单染用量的筛选 | 第60-61页 |
| ·死、活孢子悬浮液不同比例混合经SYTO/PI染料染色后的活性检测结果 | 第61页 |
| ·ViaCount染料用量的筛选 | 第61-62页 |
| ·死、活孢子悬浮液不同比例混合经ViaCount染料染色后的活性检测结果 | 第62-63页 |
| 4 ViaCount染料染色时间的筛选 | 第63-64页 |
| 5 单细胞微量分析系统对不同水浴温度处理后的样品活性检测结果 | 第64-67页 |
| 6 建立的SDS病菌北美种活性检测方法 | 第67-68页 |
| 讨论与结论 | 第68-73页 |
| 1.讨论 | 第68-72页 |
| ·镰刀菌的MALDI TOF MS检测 | 第68-69页 |
| ·影响MALDI TOF MS分析的试验因素分析 | 第69-71页 |
| ·溶剂处理 | 第69页 |
| ·蜗牛酶处理 | 第69-70页 |
| ·影响MALDI TOF MS分析其他重要试验因素 | 第70-71页 |
| ·SDS病菌的活性检测 | 第71页 |
| ·活性检测试验因素分析 | 第71-72页 |
| 2 结论 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 论文发表情况 | 第82页 |
| 攻读硕士学位期间参加的研究项目 | 第82页 |
| 论文所用缩写及中英文对照 | 第82-83页 |
| 附表 | 第83-92页 |
| 图版 | 第92-95页 |
