| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第12-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-43页 |
| ·口蹄疫病毒 | 第14-20页 |
| ·口蹄疫病毒的分子生物学 | 第14-18页 |
| ·口蹄疫病毒的抗原性与免疫机制 | 第18-20页 |
| ·口蹄疫的流行病学 | 第20-22页 |
| ·易感动物 | 第20-21页 |
| ·传染源 | 第21页 |
| ·传播方式 | 第21-22页 |
| ·OIE对无口蹄疫的规定 | 第22页 |
| ·口蹄疫病毒活载体疫苗的研究 | 第22-26页 |
| ·腺病毒载体疫苗 | 第23页 |
| ·痘病毒载体疫苗 | 第23-24页 |
| ·疱疹病毒载体疫苗 | 第24-25页 |
| ·其他病毒载体疫苗 | 第25-26页 |
| ·蛋白转导 | 第26-30页 |
| ·蛋白转导的发现与提出 | 第27页 |
| ·蛋白转导结构域的氨基酸组成 | 第27-28页 |
| ·蛋白转导的作用机制 | 第28-29页 |
| ·蛋白转导的应用 | 第29-30页 |
| ·核酸疫苗 | 第30-33页 |
| ·DNA疫苗的特点 | 第31页 |
| ·DNA疫苗诱导的免疫反应 | 第31-32页 |
| ·DNA疫苗的潜在不足 | 第32-33页 |
| ·口蹄疫疫苗 | 第33-36页 |
| ·口蹄疫活疫苗 | 第33-34页 |
| ·口蹄疫灭活疫苗 | 第34-35页 |
| ·口蹄疫新型疫苗 | 第35-36页 |
| ·基因工程疫苗 | 第35页 |
| ·合成肽疫苗 | 第35页 |
| ·核酸疫苗 | 第35-36页 |
| ·其他新型疫苗 | 第36页 |
| ·国内外成功消灭口蹄疫暴发事件的启示 | 第36-43页 |
| ·国内外消灭口蹄疫的成功案例 | 第36-39页 |
| ·防止口蹄疫入侵的成功案例 | 第39-41页 |
| ·防制和扑灭口蹄疫的成功案例给我们的启示 | 第41-43页 |
| 第2章 研究的目的与意义 | 第43-45页 |
| 第3章 O型口蹄疫DNA疫苗的研究 | 第45-67页 |
| ·实验材料 | 第45-49页 |
| ·菌种、载体与质粒 | 第45-46页 |
| ·主要药品与试剂 | 第46页 |
| ·主要培养基及配制 | 第46-47页 |
| ·缓冲液 | 第47-49页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第49页 |
| ·试验动物 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-55页 |
| ·VP22基因的PCR扩增 | 第49页 |
| ·P1基因的PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·P1/2A/3C基因的PCR扩增 | 第50页 |
| ·PCR或酶切产物的回收 | 第50页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第50页 |
| ·连接产物的转化 | 第50页 |
| ·克隆到T载体 | 第50-51页 |
| ·质粒的小量制备 | 第51页 |
| ·质粒的大量制备(碱裂解法) | 第51-52页 |
| ·P1-ELISA方法的建立 | 第52页 |
| ·Western blotting检测目的蛋白在真核细胞中的表达 | 第52-53页 |
| ·微量中和试验 | 第53-54页 |
| ·细胞免疫的检测 | 第54-55页 |
| ·小鼠核酸免疫 | 第55页 |
| ·统计学分析 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-61页 |
| ·VP22基因的PCR扩增 | 第55-56页 |
| ·P1基因的PCR扩增 | 第56页 |
| ·P1/2A/3C基因的PCR扩增 | 第56-57页 |
| ·DNA疫苗的构建 | 第57-58页 |
| ·P1基因和P1/2A/3C基因在BHK-21细胞中的表达 | 第58页 |
| ·pcDNA-VP22-P1和pcDNA-VP22-P1/2A/3C诱导的口蹄疫P1 ELISA抗体比较 | 第58-60页 |
| ·两种DNA疫苗诱导的淋巴细胞增殖比较 | 第60页 |
| ·pcDNA-VP22-P1和pcDNA-VP22-P1/2A/3C诱导的口蹄疫病毒中和抗体 | 第60-61页 |
| ·讨论与结论 | 第61-67页 |
| ·提高DNA疫苗免疫效果的策略 | 第61-62页 |
| ·牛疱疹病毒VP22基因与DNA疫苗 | 第62-63页 |
| ·DNA分子佐剂增强DNA疫苗免疫效果 | 第63-65页 |
| ·DNA与其他疫苗联合免疫的策略 | 第65页 |
| ·结论 | 第65-67页 |
| 第4章 O型口蹄疫重组伪狂犬病毒的构建及免疫效果测定 | 第67-84页 |
| ·实验材料 | 第67-68页 |
| ·毒株、细胞、菌种与质粒 | 第67页 |
| ·主要药品与试剂盒 | 第67-68页 |
| ·主要培养基及配制 | 第68页 |
| ·缓冲液 | 第68页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第68页 |
| ·试验动物 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-71页 |
| ·PrV的基因组DNA的提取 | 第68-69页 |
| ·共转染 | 第69页 |
| ·重组病毒的空斑纯化及PCR鉴定 | 第69-70页 |
| ·Southern杂交 | 第70页 |
| ·重组病毒动物实验 | 第70-71页 |
| ·统计学分析 | 第71页 |
| ·结果与分析 | 第71-79页 |
| ·含有O型FMDV P1基因的转移质粒(pIECMV-P1)的构建与鉴定 | 第71-72页 |
| ·含有O型FMDV P1/2A/3C基因的转移质粒(pIECMV-P1/2A/3C)的构建与鉴定 | 第72页 |
| ·重组病毒的筛选与纯化 | 第72-73页 |
| ·重组病毒的Southern杂交鉴定 | 第73-74页 |
| ·重组病毒的Western blot鉴定 | 第74-75页 |
| ·重组病毒在细胞上增殖滴度的影响 | 第75页 |
| ·重组病毒的遗传稳定性 | 第75-76页 |
| ·重组病毒疫苗的制备 | 第76页 |
| ·重组病毒的TK~-/gE~-/VP22-P1和TK~-/gE~-/VP22-P1/2A/3C的FMDV PI特异性ELISA抗体 | 第76-78页 |
| ·抗PRV抗体检测 | 第78-79页 |
| ·PRV中和抗体 | 第78-79页 |
| ·PRV ELISA抗体 | 第79页 |
| ·讨论与结论 | 第79-84页 |
| ·伪狂犬病毒作为载体的特性 | 第80-81页 |
| ·目的基因的选择 | 第81页 |
| ·VP22基因和O型口蹄疫病毒P1基因和P1/2A/3C基因在重组伪狂犬病毒中融合表达 | 第81页 |
| ·重组伪狂犬病毒TK~-/gE~-/VP22-P1和TK~-/gE~-/VP22-P1/2A/3C的免疫效果 | 第81-84页 |
| 小结与展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
